分析不同颜色果袋对酿酒葡萄马瑟兰果实品质的影响,为马瑟兰葡萄的酿造提供优质原料。采用完全随机区组试验设计,以不套袋为对照,分析红袋、蓝袋、绿袋对马瑟兰葡萄果实品质(外观品质、内在品质)及抗氧化活性的影响,并对测定指标进行相关性和主成分分析。结果表明,套袋处理可以提高果粒百粒质量、还原糖含量、可滴定酸含量、pH值。红袋的果皮总酚含量、总黄烷-3-醇含量、总类黄酮含量高于对照,红袋的总酚含量、总黄烷-3-醇含量、总类黄酮含量分别是376.03,149.78,1 463.53 mg/kg,其中总黄烷-3-醇含量、总类黄酮含量和对照均有显著差异,蓝袋和黄袋降低了果皮总酚含量、总黄烷-3-醇含量、总类黄酮含量。果实成熟时,不同颜色果袋显著降低了果皮总单宁含量,黄袋的总单宁含量最低是4.62 mg/g。总体上来说,套袋处理后果皮DPPH自由基清除能力、FRAP和ABTS自由基清除能力降低,红袋的DPPH自由基清除能力、FRAP(对Fe²⁺的还原能力)、ABTS自由基清除能力和对照无显著差异,黄袋均显著降低了果皮对Fe²⁺的还原能力(FRAP)、DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力。相关性分析表明,果实可溶性固形物和还原糖、糖酸比极显著正相关,相关系数分别为0.98,0.95。在果皮品质方面,果皮总酚和总黄烷-3-醇、总类黄酮极显著正相关,相关系数分别是0.95,0.98,总黄烷-3-醇和总类黄酮极显著正相关,相关系数是0.98。在果皮抗氧化活性方面,FRAP和DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力极显著正相关,相关系数分别是0.74,0.86。可溶性固形物、还原糖、糖酸比均和果皮总花色苷极显著正相关,相关系数分别是0.93,0.90,0.92。将所有测定指标进行主成分分析,提取特征值大于1的2个主成分,贡献率分别为78.31%,10.09%,累计贡献率88.40%,基本可以代表品质指标的大部分数据。在吐鲁番地区红袋、蓝袋均可提高果实品质,且以红袋效果最佳。

果实发育是决定葡萄产量和质量的关键时期,WRKY家族转录因子在调节植物生长发育和环境适应过程中发挥重要作用。乙烯是调控果实发育的重要植物激素,ACC合成酶是调节乙烯合成的关键酶。为研究葡萄WRKY家族转录因子VvWRKY13在果实发育过程中的作用及其与乙烯之间的作用关系,以葡萄品种左优红、VvWRKY13过表达葡萄愈伤组织以及转VvWRKY13番茄株系为材料,利用植物生理生化方法及分子生物学技术进行研究。结果表明,在葡萄果实发育早期VvWRKY13、ACC合成酶基因VvACS2和VvACS7表达量均显著上调;VvWRKY13过表达葡萄愈伤组织中VvACS7表达量显著高于对照,VvACS2与对照差异不显著;酵母单杂交试验证明,VvWRKY13可与VvACS7启动子直接结合,与VvACS2无直接作用。同时,异源过表达VvWRKY13番茄中乙烯含量与合成酶基因ACS家族一些成员,如 SlACS1b、SlACS4和SlACS6,表达量显著高于野生型,番茄开花—果实转色的时间比野生型缩短3~6 d。以上结果表明,VvWRKY13能够通过促进ACC合成酶基因表达调控乙烯合成,进而促进果实发育。

为了探明设施内铺设反光膜对果实品质的影响和促进着色的机理,以京艳为试材,行间铺设反光膜,监测覆膜后葡萄果实的外观与花色苷含量的变化,利用高通量测序和Illumina Novaseq 6000测序平台对着色差异的果皮进行转录组测序及差异表达基因分析。结果表明,12个样本得到了41 151 986~46 673 908条Clean reads,且Q30都在94%以上、Q20在98%以上。Clean reads与葡萄参考基因组比对总数为92.69%~94.22%。差异表达的基因统计结果显示,CK 0 d~CK 7 d差异表达基因数目是3 768个,上调基因1 488个,下调2 280个;覆膜后RF 0 d~RF 7 d差异表达基因数目是5 129个,其中上调表达2 048个,下调表达3 081个,可见覆膜能够促进基因的差异表达。覆膜7 d后,与对照相比,获得934个差异表达基因,上调表达441个,下调表达493个。KEGG富集分析表明,934个DEGs中,共有179个被注释到64条信号通路上,主要富集在代谢、细胞过程、环境信息处理、遗传信息处理和生物系统五大类代谢途径。其中,苯丙烷生物合成、内质网蛋白加工、植物病菌互作、植物激素信号传导途径多个基因表达出现差异。PAL、F3'H、3GT的多个转录本均上调表达,多个生长素相应蛋白基因下调表达。转录因子WRKY基因以上调表达为主,bHLH、C2H2、NAC、MIKC-MADS、Dof等多是下调表达。综上所述,铺设反光膜可能通过提高苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性,提高相关基因(F3'H、3GT等)的表达,从而促进花色苷合成。转录因子WRKY、bHLH、C2H2、MYB、NAC、MIKC-MADS、Dof也可能发挥重要的调控作用。

为探究氨基酸水溶肥对葡萄产量和品质的影响,以盛果期早黑宝葡萄为试验材料,设置3个处理:常规施肥(CK);增施有机肥(OPT);有机肥+氨基酸水溶肥处理(OPT+AA),研究外源氨基酸对葡萄产量、生长、品质及土壤养分的影响。结果表明,与CK相比,OPT处理葡萄产量降低14.17%,OPT+AA处理葡萄产量降低7.50%,但均不显著。与CK相比,OPT、OPT+AA处理化肥偏生产力均显著增加,OPT+AA处理的N、P₂O₅、K₂O偏生产力分别显著增加73.44%,85.01%,85.01%;OPT+AA处理总糖显著增加8.09%,可溶性固形物显著增加1.32百分点,糖酸比显著增加38.80%,可滴定酸含量显著减少0.16百分点;OPT+AA处理新梢全磷含量显著增加24.73%,全钾含量显著增加24.73%。此外,OPT和OPT+AA处理并不会影响树体生长,且能够有效减少速效养分淋洗、提高植株根域养分含量。综上所述,通过化肥减施并增施有机肥对葡萄产量无显著影响,但可以减少速效养分的淋洗,显著提高化肥偏生产力;在增施有机肥的基础上增施氨基酸水溶肥能够促进树体养分吸收,提高葡萄产量,显著提升果实品质。

在葡萄生长发育过程中,常常面临干旱、盐、热及冷胁迫等非生物胁迫影响。其中,干旱胁迫是抑制葡萄营养生长与生殖生长最重要的非生物胁迫之一。尽管葡萄属于较为耐旱的果树作物,但我国主要葡萄栽培区域约一半地区属于干旱及半干旱气候,在这些地区干旱胁迫往往威胁到葡萄的正常生长,是制约葡萄产业发展的主要因素之一。为了保障我国葡萄的健康发展,目前,针对干旱胁迫对葡萄影响的研究、合理灌溉制度的制定、抗旱品种的选育已成为近年来的研究热点。介于干旱胁迫对葡萄较为广泛的影响,为了应对干旱胁迫,葡萄进化出了一系列调控机制来平衡干旱胁迫带来的影响,本研究首先从葡萄耗水规律分析了葡萄不同生育期对水分的需求程度,其次,分析干旱胁迫对光合作用、渗透调节、活性氧调节的影响,从生理角度探讨了干旱胁迫对葡萄主要理化指标的影响,且通过对干旱胁迫下对葡萄果实的品质与产量进行分析,综述了干旱胁迫对葡萄果实品质的影响,并对如何合理利用干旱胁迫提升葡萄品质等问题,以及进一步研究葡萄响应干旱胁迫的分子机制进行了展望。

为了确定灰葡萄孢致病基因BcPDR1与病菌MAPK途径基因BcBMP1和BcBMP3之间的关系,利用实时荧光定量PCR技术,分析BcPDR1基因突变体中BcBMP1、BcBMP3的表达情况以及BcBMP1、BcBMP3基因RNAi突变体中BcPDR1的表达情况;在突变体ΔBcpdr1背景下,构建了BcBMP1和BcBMP3过表达的菌株ΔBcpdr1/BcBMP1-OE和ΔBcpdr1/BcBMP3-OE,并对过表达菌株的表型特征和致病能力进行分析。结果发现,BcPDR1基因突变体BCt89和ΔBcpdr1中BcBMP1、BcBMP3的表达水平显著优于野生型菌株和回复菌株,BcBMP1、BcBMP3基因RNAi突变体中BcPDR1的表达水平显著低于野生型;过表达菌株ΔBcpdr1/BcBMP1-OE和ΔBcpdr1/BcBMP3-OE的菌落形态、菌丝形态、生长速率、产孢量和致病力均与突变体ΔBcpdr1表现明显的不同,而更接近野生型BC22。结果表明,灰葡萄孢BcPDR1与BcBMP1、BcBMP3的表达水平密切相关,BcPDR1负调控BcBMP1、BcBMP3的表达,而BcBMP1、BcBMP3正调控BcPDR1的表达。

为了探明葡萄抗霜霉病基因的抗病机制,分别以感病品种玫瑰香和抗病品种摩尔多瓦叶片为试材,离体接种葡萄霜霉病菌,在光照培养箱中培养。用JEOL-6360型扫描电子显微镜观察霜霉菌侵染不同品种叶片后的发育情况,并利用MGISEQ-2000高通量测序平台对2个品种进行转录组测序及差异表达基因分析。结果表明,玫瑰香在接种4 d后叶片背面出现肉眼可见的白色霉层,病斑随时间延长面积增大,叶片正面相应位置出现褪绿黄斑,而在摩尔多瓦叶片上仅在接种点处有少量黑斑。电镜观察结果显示,玫瑰香叶片上病原菌孢子侵入气孔,萌发长出新的孢子囊梗,释放出孢子,在叶片上繁殖;摩尔多瓦叶片上的孢子囊数量少,大部分气孔关闭,气孔周围有少量孢子、菌丝和组织碎片分布。转录组数据共获得约664.86 Mb高质量序列,与玫瑰香相比,在摩尔多瓦中检测到5 095个差异表达基因,其中2 975个为上调表达基因,2 120个为下调表达基因。GO分析显示,差异表达基因主要富集在生物学途径(代谢过程、细胞过程、对刺激的反应和生物调节类别)、细胞组分(细胞、膜、膜组分和细胞器)和分子功能(催化活性和组装、转运体活性、转录调节因子活性)三大类。KEGG分析差异表达基因,主要富集在植物病原菌互作途径和MAPK信号转导途径等通路中。选取其中9个可能与葡萄抗病性相关的基因,qRT-PCR结果表明,9个候选基因在葡萄响应霜霉菌侵染过程中发挥一定的作用。

旨在为梅乐葡萄优质生产和精准施肥提供理论基础,通过对各生育期、不同组织部位矿质元素含量的测定,并依据果实酚类物质所形成的品质指数进行营养诊断分析。利用Topsis分析法,计算果实酚类物质的综合品质指数,即CI值,通过比较不同生育期各组织各矿质元素含量与CI值的相关性,确定营养诊断因子;采用CND法对高优品质指数的果园进行划分,对低优果园进行营养诊断。结果表明,蓬莱产区梅乐葡萄叶片、叶柄与果实各矿质元素间存在显著的协同与拮抗关系。转色期果实N、成熟期果实P、转色期果实K、转色期叶片Ca、盛花期花序Mg、转色期果实Fe、盛花期叶片Mn、成熟期果实Zn、盛花期叶柄Cu、转色期叶柄B、盛花期叶片Mo被选为植株营养诊断因子。高优园的品质指数拐点值为0.735 5,其中有7个果园满足此条件,占总体样本的14.58%。依据高优园植株矿质元素含量范围确定营养诊断因子的适宜值分别为:N(8.85~11.81)mg/g、P(1.98~4.26)mg/g、K(14.97~20.70)mg/g、Ca(35.57~68.83)mg/g、Mg(3.69~15.51)mg/g、Fe(70.96~103.26)mg/kg、Mn(166.20~277.67)mg/kg、Zn(10.71~20.27)mg/kg、Cu(9.54~14.90)mg/kg、B(11.44~17.07)mg/kg、Mo(0.69~1.60)mg/kg。低优园营养诊断表明,其植株的K、Ca、Mn、Mg表现偏低。以获得最高果实品质指数为目标,每公顷建议施肥量分别为N 62.25 kg、P₂O₅ 46.50 kg、K₂O 0.00 kg、CaO 56.25 kg、MgO 46.50 kg。Ca和Mg肥施应采用少量多次的原则;加强果园水肥管理,提高树体对K元素吸收;通过叶面喷施,适当补充缺乏的Mn元素。

旨在探讨不同砧木对马瑟兰葡萄酿酒品质的影响,为酿酒葡萄栽培调控提供理论参考,以2018年不同砧木(SO4、5BB、3309M和101-14)嫁接的酿酒葡萄马瑟兰为试材,以扦插苗为对照,2020,2021年果实成熟时进行采收,对果穗性状和酿酒品质等进行检测。结果显示,2021年砧穗组合的果穗紧密度、果穗质量、平均果粒质量、果粒纵横径、最大果粒质量、萎蔫数量较2020年有所下降,但对照的果粒纵横径和平均果粒质量增加;砧木嫁接可提高马瑟兰葡萄的果粒纵横径、平均果粒质量、平均种子数量,但2 a的果粒质量变异系数差别不大。2020年M/SO4、M/5BB和M/3309M的果粒质量大多分布在1.01~1.25 g,M/101-14果粒质量大多分布在0.76~1.00 g;2021年M/5BB、M/3309M和M/101-14的果粒质量大多分布在0.76~1.00 g,M/SO4果粒质量大多分布在1.01~1.25 g。砧木可降低果实可溶性固形物、提高总酸质量浓度。经LCMS/MS法测定花色苷的组分和含量,结果显示,二甲花翠素含量最高,其次是花翠素,花葵素含量最少。与对照相比,M/5BB极显著提高了果皮总花色苷含量,比对照提高了26.62%;M/3309M和M/101-14提高了花色苷含量,但与对照间无显著差异;M/SO4极显著降低了花色苷含量,比对照降低了11.87%。

为了研究腐植酸在葡萄上的应用方法,探明腐植酸等碳替代有机肥的最佳比例,连续2 a采用小区试验以纯化肥施肥模式为对照(CK处理),在农民习惯施肥(FFP处理)的基础上,设置3个腐植酸等碳替代有机肥比例:10%碳量替代(T1处理)、20%碳量替代(T2处理)、30%碳量替代(T3处理),研究其对葡萄产量、品质、土壤养分等指标的影响,采用主因素分析的方法筛选最佳的替代比例。结果表明,连续2 a T2处理的产量最高,但与T3处理无显著差异。T1、T2、T3处理单穗质量和单粒质量显著高于CK处理,但与FFP处理无显著差异;综合来看,腐植酸替代有机肥处理的可溶性固形物、可溶性糖、可滴定酸、维生素C含量均优于其他处理。通过相关性分析可知,土壤速效钾、有机质、酸性磷酸酶与葡萄产量呈极显著正相关。土壤有效磷、速效钾、有机质、酸性磷酸酶均与葡萄的可溶性固形物、可溶性糖、维生素C含量呈极显著正相关,说明腐植酸等碳替代有机肥是通过调控上述土壤指标以实现葡萄增产提质;通过主因素分析可知,2019,2020年均有2个特征值大于1的主因素,2个主因素方差累积贡献率达到88.864%~91.470%,且T2处理连续2 a综合得分最高。综合来看,采用腐植酸等碳量替代20%的有机肥为最佳比例。

分析蓬莱产区梅乐葡萄盛花期、转色期、成熟期的叶片、花/果实中矿质变化规律及其相关性，为梅乐葡萄的营养诊断及科学施肥提供理论依据。2018-2020年连续以蓬莱产区16个固定配方施肥条件下的梅乐葡萄为研究对象，每个配方肥选择4个果园，共计192个梅乐葡萄园，比较不同生育期叶片、花/果实矿质元素含量差异，应用相关分析法筛选影响果实矿质营养含量的主要叶片养分因子。叶片Fe、B和花/果实N、P、K、Mg、Fe、B含量在各生育期均表现为盛花期>转色期>成熟期，且不同生育期间差异显著。叶片Mn、Cu和果实Cu含量均表现为转色期>成熟期>盛花期，且各生育期间差异显著。除盛花期N、Ca、Mg、成熟期Cu、全生育期Mn外，其他叶片与花/果实矿质元素呈显著或极显著差异。N、Ca、Mo含量在各生育期均表现为叶片>果实。Fe、Mn、Zn、B含量在各生育期均表现为果实>叶片。P、K含量在盛花期和转色期均表现为果实>叶片，在成熟期均表现为叶片>果实。Mg、Cu含量在盛花期均表现为果实>叶片，在转色期、成熟期均表现为叶片>果实。梅乐葡萄叶片和果实矿质元素变化规律存在相似性和特异性，可能是由叶片和果实各矿质元素之间存在不同程度协同或拮抗作用造成的。相关分析表明，叶片和果实各元素含量在不同生育期间呈现不同程度的相关性。P、K、Fe、Zn、Cu、B是梅乐葡萄花发育过程中不可或缺的元素。盛花期-转色期梅乐葡萄叶片和果实中Ca、Mn、Cu含量均显著提高。在梅乐葡萄果实成熟期，叶片中N、P、K、Ca、Mg、Mo极显著高于果实，其中Ca、N、K含量较高，说明在果实生长发育过程中对Ca、N、K的需求量高于其他矿质元素。综上，可以通过调控花前叶片中P、K、Ca、Mg、Fe、Zn、Cu、B、Mo水平调控花中P、K、Fe、Cu、B含量；由于叶片中的Ca不易有效转运至果实中供其利用，因此Ca应有针对性地直接施用于幼果上。转色期，可通过提升叶片中Mn、Cu水平调控果实中Mn、Cu含量。成熟期，可通过提升叶片N、K、Ca水平调控果实中P、K、Zn、Mn含量。

为了明确砧木对酿酒葡萄生长和品质的影响，为宁夏产区酿酒葡萄生产中筛选适宜的砧穗组合提供参考依据。以霞多丽和美乐为接穗，分别与3种砧木嫁接，研究了砧木对2种葡萄生长、果实品质及产量的影响。结果表明，霞多丽嫁接在5BB、1103P和110R 3种砧木上对生长有不同程度的促进作用，其中1103P显著提高主干粗度、叶面积及叶片SPAD值，增强生长势的效应最为明显；5BB显著提高了霞多丽果实中还原糖和可滴定酸含量，1103P则降低了果实中还原糖的累积，使可滴定酸含量升高，110R对糖酸含量影响不显著；1103P和110R显著降低了霞多丽果实总酚含量，5BB和1103P显著提高了果实花青素含量。3种砧木对霞多丽单株产量无显著影响。美乐嫁接在140R、5BB和SO4 3种砧木上明显减缓生长，其中以140R为砧木显著降低主干粗度、新梢长度和粗度、叶面积及SPAD值，减弱生长势效应最为明显；SO4显著降低美乐果实还原糖含量、提高可滴定酸含量，5BB对果实还原糖含量无显著影响，但显著提高可滴定酸含量，140R对糖酸含量影响不显著；3种砧木均提高了美乐果实单宁和花青素含量，其中140R嫁接苗单宁含量与自根苗差异显著，SO4、140R嫁接苗花青素含量显著高于自根苗；砧木5BB显著提高美乐单株产量。综上，霞多丽以5BB为砧木综合表现最好；对于美乐，自根苗表现最好，5BB在稳定树势、保持品质、提高产量方面的综合表现优于140R和SO4。

针对延怀盆地葡萄种植区长期受大风侵蚀，土壤沙化严重的问题，明确行间生草对葡萄园土壤理化性质的影响，探索北方埋土防寒区葡萄园行间生草技术。以怀来县为研究对象，于2017年在树龄为10 a的葡萄架下种植苔草和二月兰，以传统清耕为对照。种植3 a后采集土壤样品，分析土壤容重、持水量、团聚体含量、总碳、总氮、有机质、硝态氮、氨态氮以及有效态铁锰铜锌含量。结果表明：与传统清耕相比，种植3 a二月兰能显著增加0~20 cm表层土壤硝态氮含量，增加0~80 cm土层土壤有效磷、全氮含量，有效改善土壤物理性状；与传统清耕相比，种植3 a披针叶苔草能显著增加0~20 cm表层土壤有机质和全氮含量；二月兰与披针叶苔草连续种植3 a后均不同程度增加了葡萄园表层土壤各级团聚体中碳氮的含量。种植二月兰在提高0.125~0.250 mm粒级团聚体碳氮含量的效果最为明显；而苔草则表现为提高0.075~0.125 mm粒级团聚体碳氮含量的效果最为明显；2种行间生草方式对葡萄园沙化土壤团聚体结构的影响不同，种植3 a苔草显著增加>0.25 mm大团聚体含量，而种植3 a的二月兰因人为翻耕原因，导致<0.250 mm粒级团聚体显著增加。在延怀盆地葡萄行间种植草本植物能有效改善土壤理化性状，不同种类草本植物对土壤理化性状改善效果不同，因此在北方埋土防寒区选择适宜草种是推广该项技术的重要环节。

为了研究蛇龙珠葡萄各生育期施氮量对叶片光合特性和同化产物积累的影响，在滴灌条件下，设定4个尿素施用量：150（N1），300（N2），450（N3），600 kg/hm²（N4），对照（CK）设置为0 kg/hm²，分析各生育期（花前5 d DBF5、花后20 d DAF20和花后50 d DAF50）不同氮素营养对葡萄叶片的光合荧光参数及碳代谢相关指标的影响。结果表明：适量增施氮肥提高了叶片叶绿素含量和RuBp羧化酶活性，增强了葡萄树的光合作用，而叶片中PSⅡ有效光化学效率（Fv'/Fm'）、光化学淬灭系数（qP）、PSⅡ实际光化学效率（ΦPSⅡ）的提高及非光化学淬灭系数（NPQ）的降低使叶片叶绿素荧光增强，且N2下的Fv'/Fm'、ΦPSⅡ、qP在DAF20和DAF50时比同期CK分别显著升高了16.10%，17.80%；21.49%，21.13%及11.77%，19.73%；适量增施氮肥提高了蔗糖代谢相关酶的活性和可溶性糖含量，减少了淀粉含量，且在整个生育期，SPS、SS以及蔗糖在N3下有最高值，葡萄糖和果糖在N2下有最高值，而在DBF5、DAF20和DAF50时NI和AI分别在N2、N2和N1处理下有最高值。同CK相比，N2处理显著增加了可溶性糖、单宁、花青素的含量和可滴定酸含量，提高了坐果率和糖酸比，产量达14.50 t/hm²。综上，在300~450 kg/hm²的尿素施用范围内明显增强了叶片光合作用，促进可溶性糖的合成，从而为葡萄果实的生长发育供应足够的营养。

为了对葡萄HXK基因家族进行鉴定和表达分析，利用拟南芥和玉米的HXK （Hexokinase）基因注册序列，从葡萄全基因组中鉴定得到HXK基因4个，并命名为VvHXK1、VvHXK2、VvHXK3和VvHXK4，对其进行生物信息学分析。蛋白质理化性质分析结果表明，每个基因编码的氨基酸个数分布在412-524 aa，VvHXK4是碱性蛋白，其余3个均为酸性蛋白；亚细胞定位分析表明，4个VvHXK基因都在细胞质中表达，且VvHXK4主要定位于叶绿体，而VvHXK2也存在于线粒体和细胞核中；蛋白质的二级结构预测表明，4个VvHXK基因编码的蛋白主要以α-螺旋为主；外显子结构分析表明，除VvHXK1含10个外显子外，其余3个都有9个外显子，说明VvHXK基因比较保守；启动子顺式作用元件分析表明，4个VvHXK基因均含有ABA响应元件和MYB及WRKY转录因子的结合区域，而VvHXK4中没有发现低温响应元件；系统进化树分析表明， VvHXK1与拟南芥AtHXK1的同源关系最近，推测其不仅具有调节生长发育，影响根系的生长等功能，而且具有加速衰老的作用。VvHXK2与马铃薯StHXK1的同源关系最近，推测其具有使叶绿体中的葡萄糖磷酸化活性升高的功能。VvHXK3与马铃薯StHXKRP1的同源关系最近，可能具有诱导离体叶片中糖表达的作用。VvHXK4与菠菜SoHXK1的同源关系最近。荧光定量分析表明， VvHXK2、VvHXK3和VvHXK4均在20 g/L的葡萄糖处理下相对表达量最高，即其对葡萄糖磷酸化最显著，在果糖和蔗糖的处理下表达量较低。

为了明确各葡萄香型的特征香气物质，采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术对葡萄15个品种果实（2个无香型、5个草莓香型、8个玫瑰香型）香气成分进行了检测和分析。结果显示：无香型葡萄维多利亚、摩尔多瓦的香气物质主要是醛类物质，香气物质中相对含量最高的为2-己烯醛；草莓香型葡萄申丰、巨峰、沪培2号、辽峰、硕丰的香气物质主要是醛类、醇类、酯类物质；玫瑰香型葡萄的香气物质主要是以醛类、萜烯类物质为主。醛类物质主要是2-己烯醛、正己醛；萜烯类物质主要是芳樟醇、二氢芳樟醇、α-萜品醇、橙花醇、香叶醇等物质。不同葡萄品种在香气物质、物质含量间存在差异。结果可为后期葡萄香气机理研究、育种与推广提供参考和理论依据。

为了确定评价不同葡萄品种设施环境适应性的方法，为葡萄设施栽培的品种选择提供理论依据。首先测定22个葡萄品种的光补偿点、表观量子效率、设施内外光合潜力差值、叶绿素总含量、叶绿素a和b含量、栅栏组织和海绵组织及叶片厚度、干比叶质量、CO₂补偿点、羧化效率、蒸腾速率、暗呼吸速率和水分利用效率等生理指标，然后运用相关性分析，确定与连年丰产能力密切相关的生理指标，最后以与连年丰产能力密切相关的生理指标为基础数据，以连年丰产能力作为验证指标，对运用熵值法、Topsis方法和熵权Topsis方法等评价方法对葡萄的设施环境适应性得出的评价结果进行比较分析，筛选出快速有效的评价设施葡萄环境适应性的方法。结果表明：无核白鸡心和红香妃两葡萄品种可作为评价某葡萄品种是否适于设施栽培的参照品种。叶片光补偿点、叶绿素a含量、叶绿素总含量、设施内外光合潜力差值等4个生理指标与连年丰产系数显著相关，可作为评价设施葡萄环境适应性的基础数据。熵权（权重分别为光补偿点0.324、光合潜力差值0.250、叶绿素a含量0.227、叶绿素总含量0.199） Topsis综合评价法对设施葡萄环境适应性评价结果的排序与其连年丰产系数排序基本相同，Topsis综合评价法次之，熵值法最差。

针对新疆产区研究砧木对接穗影响的研究较少，探讨不同砧木对马瑟兰葡萄生长势、光合特性和果实品质的影响，旨在为新疆玛纳斯河流域生产上选择适宜的酿酒葡萄砧穗组合提供理论依据。以2 a生马瑟兰/5BB、马瑟兰/SO4砧穗组合为处理，马瑟兰自根为对照，测定不同砧木马瑟兰的生长势、光合与叶绿素荧光参数及果实品质，并用主成分分析方法综合评价砧穗组合的优劣。结果表明：马瑟兰/5BB的节间粗度、节间长度、SPAD值、坐果量显著高于马瑟兰自根苗。马瑟兰/5BB净光合速率（Pn）、气孔导度（Gs）及PSⅡ实际光化学效率（Φ_PSⅡ）最大，胞间CO₂浓度（Ci）、非光化学猝灭系数（NPQ）最小。马瑟兰/SO4穗质量、果皮厚度、种子数量均最大，而葡萄皮总单宁含量最小。马瑟兰/5BB总糖含量、葡萄皮总类黄酮含量、葡萄皮总花色苷含量最大，而种子质量最小。根据主成分分析的综合得分由高到低依次为：马瑟兰/5BB > 马瑟兰/SO4 > 马瑟兰自根苗。研究发现，砧木5BB的适应性优于SO4，且马瑟兰/5BB砧穗组合的亲和性高、生长势强、光合作用效率高、果实品质优，为新疆玛纳斯河流域适宜的砧穗组合。

为了探讨不同有机肥对巨峰葡萄园的施肥效果，为葡萄园的科学施肥提供可靠的依据。研究了3种有机肥料（生物有机肥（BF）、羊粪（SM）和猪粪（PM））在3年生的有机葡萄园内设置处理，研究其对辽宁兴城种植葡萄根系生长和土壤养分状况的影响。结果表明，生物有机肥施用增加总根长、根表面积效果最佳；生物有机肥和羊粪处理均能显著提高根系中全氮含量（P<0.05），且生物有机肥处理组的含量最高。生物有机肥处理明显提高根系中多数矿质元素含量，尤其在收获期除B元素外，其他所研究元素的峰值均出现在生物有机肥处理组。施肥处理均提高了转色期和收获期的土壤有机质含量（P<0.05），皆表现为生物有机肥 > 羊粪 > 猪粪 > 对照，生物有机肥、羊粪和猪粪在转色期较对照分别提高了70.72%，53.67%，52.31%；在收获期，较对照分别显著提高了51.61%，36.14%，34.84%（P<0.05）。施用有机肥能提高转色期和收获期土壤中的碱解氮和全氮含量，均表现为生物有机肥 > 羊粪 > 猪粪 > 对照，其中只有生物有机肥条件下的碱解氮和全氮含量在不同时期均与对照出现显著性差异（P<0.05）。生物有机肥和羊粪处理组的土壤有效磷含量在转色期和收获期均显著高于对照，而猪粪与对照不存在显著性差异。施肥处理均能引起土壤矿质元素含量不同程度的提高；其中土壤中B和Mo元素在转色期的含量要低于对照，其原因可能是由施肥处理后增强了树体对微量元素的吸收，而有机肥中微量元素释放较慢所导致的。与对照相比，3种有机肥料均可改善葡萄根系的生长、提高根系内矿质元素含量，提高土壤内有机质、全氮、有效磷及矿质元素含量，但施用生物有机肥效果最佳。

探究白藜芦醇合酶（Resveratrol synthase，Rs）在巨峰葡萄果实发育中的潜在作用。对其序列进行结构及功能分析，并鉴定其在果实不同发育时期的时空表达特异性。采用生物信息学分析及qRT-PCR的方法，对巨峰葡萄Rs基因序列进行分析，并对其结构和亚细胞定位进行预测，以及分析果实不同时期不同组织的表达情况。克隆得到的Rs基因cDNA全长1 539 bp，开放阅读框（ORF）为1 179 bp，编码392个氨基酸，预测蛋白分子质量42.88 ku，理论等电点（pI）为6.09，且该基因含有查耳酮和二苯乙烯合酶活性位点以及完整的芪合酶家族特征位点；蛋白互作预测发现，Rs和OMT2.1具有互作，后者可催化白藜芦醇生物合成紫檀芪；亚细胞预测结果表明，Rs基因主要在细胞质和叶绿体中表达；启动子分析发现，Rs基因表达可能受光照、MYB、真菌和激素的调控并存在一定的组织特异性。qRT-PCR表达分析显示，葡萄Rs基因在果皮和果肉中不同时期均有表达，但在花后25 d的青皮中表达量最高。结合Rs基因在白藜芦醇积累的作用，可以推测可能在果实发育前期的果皮中白藜芦醇有较高积累。巨峰葡萄Rs基因在进化过程中具有较高的保守性，其表达可能受环境、真菌和激素的调控且与OMT2.1具有互作效应。而且在不同的组织和时期存在一定的特异性。

为改善葡萄果实着色效果，探讨日光温室内ALA处理最佳浓度。在弗雷无核葡萄果实膨大期和着色期，利用50，100，150 mg/L的5-氨基乙酰丙酸（ALA）溶液喷布果实，研究外源ALA处理对葡萄果实外观色泽、内在品质及花青素合成相关酶活性的影响。结果表明：在果实成熟过程中，外源ALA处理均能诱导果皮花青素的积累，促进果皮着色，缓解果皮叶绿素和类胡萝卜素的降解速率；果实可溶性糖含量显著提高，可滴定酸含量明显下降。ALA处理后果皮花青素含量与PAL活性极显著相关，与DFR活性均无显著相关性，CHI活性仅在处理后与果皮花青素含量极显著相关，但经ALA处理后，果皮PAL、CHI、DFR活性较对照均有不同程度的提升，由此推测，ALA通过上调相关调控因子的表达来诱导花青素合成积累，从而改善果实外观及内在品质。

为解决葡萄根系上浮和土壤酸化问题，探明葡萄园生草对葡萄根系生长和土壤营养状况的影响，以清耕为对照，在辽宁兴城地区葡萄园行内种植黑麦草（Lp）和紫花苜蓿（Ms），研究行内生草对葡萄不同根层根系长度和表面积、土壤有机质及矿质元素含量的影响。结果表明，黑麦草和紫花苜蓿均较清耕显著提高不同时期和不同土层的根系长度和根系表面积（P< 0.05），且其增幅为黑麦草 > 紫花苜蓿 > 清耕。黑麦草具有减轻葡萄园土壤酸化的效果，其土壤pH值6.22~7.04，高于清耕的6.14~6.39。黑麦草在坐果期、转色期和收获期的土壤有机质含量较清耕分别显著提高了24.71%，48.07%和44.44%（P< 0.05），而紫花苜蓿较对照分别提高了7.87%，29.88%和34.07%。黑麦草在坐果期、转色期和收获期时土壤中碱解氮含量较清耕分别显著提高了40.40%，51.46%，22.15%（P< 0.05），而紫花苜蓿较清耕分别提高了29.88%，28.03%，5.42%。黑麦草和紫花苜蓿较清耕均显著提高了各个时期的土壤有效磷含量（P< 0.05），钾元素含量明显升高，黑麦草处理的土壤全钾、全磷和有效磷含量最高，其次是紫花苜蓿，清耕最低。综上，行内种植黑麦草对增加葡萄根系长度和根系表面积、提高土壤有机质含量、减轻土壤酸化、增加必需营养元素含量等方面效果优于紫花苜蓿和清耕。

为高效获得葡萄霉菌病生防菌菌株，以病原真菌细胞壁的关键组分几丁质和β-1，3-葡聚糖为唯一碳源，通过底物压力筛选法，选择性地富集同时具有几丁质酶活和β-1，3-葡聚糖酶活的目的菌株。结果表明，此筛选方法有效地富集了潜在的目标菌株。挑取的10株菌均具有几丁质酶活和β-1，3-葡聚糖酶活。其中，1号菌株单位菌体几丁质酶活和单位菌体β-1，3-葡聚糖酶活分别达到2.52，0.76 U/mL；6号菌株的则分别为1.45，3.99 U/mL。酶学研究证明2株菌的酶均为诱导型，模拟自然条件下，2株菌在培养24或36 h酶活最高。经16S rDNA测序鉴定，2株菌均为假单胞菌，是一种极具生防潜力的内生细菌。

为了探究山葡萄果皮转色阶段影响花色苷组成的关键酶的表达，以山葡萄幼叶为试验材料，提取山葡萄基因组DNA，应用同源克隆方法获得了PAL基因（GenBank登录号：MH045991）的全长序列，并进行了生物学信息分析。采用Q-PCR方法对山葡萄果皮8个不同着色时期的表达量进行分析。结果显示，PAL基因的DNA序列全长是1 763 bp，具有一个1 671 bp的开放阅读框（ORF），编码556个氨基酸。分子量为61.07 ku，等电点为5.76，为稳定蛋白质。整个多肽链具有跨膜螺旋结构，无信号肽，分子进化树分析表明，与欧亚种葡萄同源性较高；PAL基因在山葡萄果皮8个时期的表达规律，分析PAL基因在后4个时期表达量的不规则变化，PAL基因在转色50%和转色100%这2个时期几乎不表达。PAL基因的表达调控受很多因素调节，在山葡萄生长发育前期呈一定规律变化，在后4个时期表达量呈不规则变化，PAL基因在转色50%和转色100% 2个时期几乎不表达，这可能受到某种抑制PAL酶活性因子的影响。

弱光胁迫下葡萄的生理特性及该环境下相关基因的表达一直缺乏研究，植物细胞会因弱光胁迫造成细胞膜系统和代谢过程的损伤，选择不同遮阴处理对葡萄进行弱光响应的相关研究，旨在为生产上该品种的抗弱光性能提供理论依据。以1年生鄞红葡萄进行盆栽试验，采用不同光照强度（0，25%，40%，70%，85%）遮阴处理，验证不同胁迫环境下该葡萄品种的生长特性、细胞保护酶活性、渗透调节物质含量变化，并且对抗逆基因MYC2、TRX进行Q-PCR表达量分析。遮阴结束后，T1处理下各项生长及酶活指标良好，但随着弱光胁迫程度的增强植株生长受阻，SOD、POD、CAT、可溶性蛋白活性先升高后逐渐降低；而MDA和PRO活性与遮阴程度呈正相关；MYC2与TRX基因表达量在胁迫环境下先上调后下降。重度胁迫下（85%）葡萄的各项生理指标均下降显著，证明适度遮阴较利于鄞红生长，但重度胁迫会对植株造成不可逆损害，自身已无法通过调节细胞保护酶及合成相关基因以适应弱光胁迫。根据以上试验结论对葡萄耐弱光品种的选育进行了讨论，并认为今后需验证更多与弱光应答相关的基因，确认其是否受到弱光诱导。

为明确灰葡萄孢致病基因BcKMO与病菌MAPK信号途径之间的关系，利用MAPK信号途径特异性的抑制剂U0126处理灰葡萄孢野生型菌株BC22、BcKMO基因的T-DNA插入突变体BCG183和回复突变体BCG183/BcKMO。结果发现，突变体BCG183对抑制剂U0126不敏感，受抑制的程度显著低于野生型和回复突变体。对BcKMO基因与MAPK信号途径关键基因bmp1和bmp3的表达规律进行分析，结果发现，BcKMO与bmp3均是在7 d的菌丝和菌核中表达水平较高，BcKMO与bmp1、bmp3基因均是在含蔗糖和果糖培养基上培养的病菌中表达水平较高。利用Real-time PCR技术，检测BcKMO基因突变对bmp1、bmp3基因表达的影响以及bmp1、bmp3基因突变对BcKMO基因表达的影响，结果发现，突变体BCG183中bmp1的表达水平均显著高于野生型和回复突变体，bmp3的表达水平显著低于野生型和回复突变体；bmp1的RNAi突变体中BcKMO基因表达水平显著高于野生型，而bmp3基因的RNAi突变体中BcKMO基因表达水平显著低于野生型。结果表明，BcKMO基因负调控bmp1的表达，正调控bmp3的表达；而bmp1负调控BcKMO基因的表达，bmp3正调控BcKMO基因的表达。研究结果可为阐明灰葡萄孢BcKMO基因调控病菌生长、发育和致病力的机制奠定基础。

为了探究不同光质以及转光条件对葡萄CO4基因表达水平及试管苗叶绿素荧光参数的影响，利用RT-PCR技术，从葡萄贝达试管苗中克隆了一个光质响应基因CO4（GenBank登录号为KY652090），并对其进行生物信息学以及qRT-PCR分析。结果表明，CO4基因片段全长663 bp，编码了248个氨基酸，其开放阅读框为747 bp；葡萄CO4有4个跨膜区，预测其为跨膜蛋白；葡萄CO4的分子式为C₁₂₅₃H₁₉₉₀N₃₂₄O₃₄₀S₁₁，预测是疏水性不稳定蛋白。系统进化树分析表明，该蛋白与巨桉CO4最为相似。经荧光实时定量PCR分析表明，在红光转蓝光处理下葡萄CO4表达量显著高于白光（对照），是对照的5.39倍；其次为蓝光处理；在白光转蓝光条件下CO4表达量最低，是对照的54%；红白转光处理下CO4表达量与对照无显著差异。叶绿素荧光参数分析结果显示，红光转蓝光处理后的Fv/Fm （最大光化学效率）、Fv/Fo （潜在活性）和qP （光化学猝灭系数）均显著高于对照，NPQ在该处理下（非光化学猝灭系数）最低；在红光处理下NPQ最高，Fv/Fm、qP最低。葡萄CO4对光质敏感，且在不同光质及转光条件下其响应水平不同，红光转蓝光处理下上调表达显著，且该光照条件下能显著促进葡萄试管苗的光化学能力。为深入研究CO基因在葡萄试管苗感光机理中的作用提供理论依据，并为葡萄光质改良奠定基础。

为研究四川猪场分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的耐药现状及其SCCmec基因型情况，讨论猪源MRSA对公共卫生带来的隐患。于2013年3-12月在四川地区12个规模化猪场采集的120份样品中分离金黄色葡萄球菌（SA），对PCR初步鉴定出SA，再鉴定mecA、femA耐药基因，阳性菌株判定为MRSA。对鉴定出的猪源MRSA进行SCCmec分型与耐药性试验及分析。共分离出60株金黄色葡萄球菌，其中22株MRSA，检出率18.3%（22/120），饲养员手棉拭子、猪鼻捻子、猪场水样中均分离出MRSA。药敏试验结果表明，22株MRSA菌株的多重耐药性明显，耐药性主要表现为4、6耐，其中SCCmec Ⅳ a型17株、SCCmecⅠ型5株。目前四川地区猪源MRSA不仅对猪场人员存在感染隐患，同时也对公共卫生安全存在一定的威胁。

为了进一步促进葡萄幼苗营养生长、有效施肥，以一年生巨玫瑰葡萄幼苗为试材，采用田间盆栽试验，利用¹⁵N示踪技术对植株进行叶面施肥和土壤施肥2种追肥处理，于新梢成熟期分3次进行整株解析测定，研究了不同施肥方式下葡萄幼苗对氮素的吸收、利用、分配特性。结果表明，不同追肥方式处理均有利于新梢和叶片生长，3个测定日期叶片全氮叶抹>土施，至9月30日叶抹处理对叶片全氮的促进作用更为显著。新梢成熟期2种不同施肥方式下各器官的Ndff存在差异，以9月10日影响最大，9月10日各器官Ndff值均为叶抹大于土施，且差异性显著；9月30日新梢Ndff值叶抹处理为10.03%，显著大于土施处理（5.61%）。3个测定日期叶片¹⁵N分配率叶抹>土施，表明叶抹处理葡萄叶片对氮素的竞争能力强于土施处理。8月20日和9月10日整株¹⁵N利用率叶抹>土施，两者间差异性显著。至9月30日，不同施肥方式下各器官¹⁵N分配率差异不显著，不同器官Ndff、及¹⁵N利用率趋于一致。叶面施肥有利于葡萄幼苗叶片对氮素的征调，能够提高植株氮素利用率，促进营养生长。

为探究6-BA对葡萄果实中有机酸积累的影响，及其调控果实有机酸合成的分子机制，以里扎马特葡萄为试材，花前5 d、花后3 d和花后10 d连续3次对花序与果穗进行6-BA处理，研究6-BA对葡萄果实中有机酸积累及其代谢相关基因表达的影响。结果表明，成熟果实中有机酸含量与6-BA处理浓度密切相关，30 mg/L处理后，成熟果实中的酒石酸和总酸含量均显著低于对照，但对苹果酸、柠檬酸和草酸含量并未产生较大影响；对于10，20 mg/L 6-BA处理而言，处理与对照成熟果实中的各种有机酸含量均不存在显著差异。基因表达结果表明，6-BA处理对IDH、MDH和PEPC基因的表达总体表现为抑制，但对于ME基因的表达则主要表现为促进。据此分析，6-BA处理抑制果实中有机酸合成的原因可能与其影响部分有机酸代谢相关基因的表达有关。

为了分析不同生育期水分亏缺下，设施延后栽培葡萄土壤生物学特性（包括土壤蔗糖酶、脲酶、土壤微生物量碳和有机碳）的变化趋势以及不同处理对果实产量与品质影响，于2013-2015年在甘肃省张掖市灌溉试验站进行了设施延后栽培葡萄灌溉试验的研究。结果表明，萌芽期-新梢生长期水分亏缺处理能够提高土壤蔗糖酶活性，开花期水分亏缺处理与CK处理相比无显著性差异，果实膨大期-着色成熟期水分亏缺处理对本阶段土壤蔗糖酶活性具有抑制作用。萌芽期是最适宜通过水分亏缺方式提高土壤蔗糖酶活性的时期。萌芽期水分亏缺处理和着色成熟期水分亏缺处理对土壤脲酶活性都具有抑制作用，新梢生长期-果实膨大期水分亏缺能提高相应生育阶段的土壤脲酶活性。而对土壤微生物熵值来说，新梢生长期水分亏缺处理对其具有显著提高的作用。根据相关分析和典型相关分析结果，果实产量增加时，土壤蔗糖酶活性增大，而土壤微生物量碳含量却显著减少；随着土壤脲酶活性增大，果实中可滴定酸含量明显增大。

为了研究葡萄肌醇半乳糖苷合成酶基因家族的特性，以抗低温品种左优红组培苗为材料，通过同源克隆技术，获得VvGolS2、VvGolS3和VvGolS4全长CDS，对其序列进行了生物信息学分析，同时利用实时定量PCR技术探究了3个基因的组织表达特性和响应逆境因子及相关信号分子的特性。结果显示：3个基因cDNA大小分别为954，978，1 011 bp，分别编码317，325，336个氨基酸序列；3个蛋白分子量分别为36.65，36.97，38.12 kDa；等电点分别为5.12，5.33和5.16，且均在C端含有一个疏水的五肽APXAA；实时荧光定量PCR证明，3个GolSs在葡萄不同组织中表达情况不同，VvGolS2和VvGolS4在叶片中表达量最高，而VvGolS3则在花和卷须中表达量最高；不同逆境因子及逆境信号分子均会影响VvGolS2、VvGolS3和VvGolS4基因的表达量，其中VvGolS2和VvGolS4基因的表达受盐诱导最明显，VvGolS3基因的表达受低温诱导最明显；另外，胁迫信号分子乙烯、过氧化氢和脱落酸均可诱导VvGolS2基因表达量上升，而VvGolS3基因的表达受脱落酸和乙烯的诱导，乙烯、过氧化氢和硫化氢则均可诱导VvGolS4基因表达量上升。综上推测，3个VvGolSs均与葡萄抵御逆境胁迫相关，但各自功能可能有所不同。

为构建灰葡萄孢犬尿氨酸单加氧酶（BcKMO）基因的原核表达载体并进行高效表达，获得纯化的BcKMO蛋白。以灰葡萄孢野生型BC22为试材，通过反转录PCR扩增BcKMO基因，回收BcKMO基因片段克隆到pMD19-T载体中，测序正确后，酶切pMD19-T-BcKMO和带有GST标签蛋白的pGEX4T-1质粒，将目的片段进行连接，构建BcKMO基因的原核表达载体pGEX4T-1-BcKMO-GST。经酶切和测序鉴定正确后，将构建好的原核载体转化大肠杆菌BL21。经IPTG诱导，在大肠杆菌BL21菌株中成功表达了与GST标签蛋白融合的BcKMO蛋白，大小约71 kDa。SDS-PAGE分析表明，该蛋白在0.2 mmol/L IPTG诱导12 h时高效表达；Western Blot结果发现目的蛋白能与GST特异性抗体起特异性反应，表明BcKMO基因的体外诱导表达成功。

为明晰北京典型冲积平原葡萄耗水规律，为该区葡萄水分高效管理提供试验依据，利用水分监测仪器记录6年生V形篱架（行株距3 m×2 m）栽培的瑞都香玉葡萄全年不同土壤深度下的土壤相对含水量变化，利用软件计算出各土层逐小时土壤含水量的减少量，当夜间土壤含水量也在减少时，不计算为根系耗水，按下渗计，最终得出不同土层不同物候的葡萄耗水量，并与近30年北京自然月降雨量相比较，分析北京平原区典型冲积平原葡萄耗水规律。结果表明：北京平原区7-9月自然降雨量与葡萄耗水量差别巨大，量级在300 mm以上；葡萄树在生长季的前半期耗水量和日耗水强度变化明显，耗水量和日耗水强度最大期均出现在果实发育期，中后期耗水变化较平稳；浅层土壤（10~50 cm）根系耗水占比量大于深层土壤（70~110 cm），由浅入深表现出典型的对数变化趋势；根系耗水量存在时空顺序变化，浅层土壤根系主要在生长季前半期耗水，深层土壤根系主要在后期耗水。

探究不同浓度一氧化氮（NO）和冷藏处理对巨峰葡萄采后贮藏品质的影响。以巨峰葡萄作为试验材料，用不同浓度NO溶液浸泡处理葡萄果实，在0，25℃条件下恒温贮藏，研究不同浓度NO和冷藏处理对巨峰葡萄采后果实硬度、维生素C含量、可溶性蛋白浓度、可溶性糖含量、活性氧含量、丙二醛含量及脯氨酸含量等物质含量的变化。相比5，30 μmol/L NO处理，15 μmol/L NO处理有效地保持了采后葡萄果实的果实硬度，推迟了果实中可溶性蛋白浓度、可溶性糖以及维生素C含量的降低时间，抑制了活性氧含量和丙二醛含量的升高，提高了采后葡萄果实的脯氨酸含量，使葡萄果实在采后储存过程中能较长时间保持果实风味，延缓腐败时间并提高果实抗逆性。而0℃冷藏能有效保持采后葡萄果实的果实硬度，抑制了果实中的丙二醛含量和活性氧含量的增加，从而大大减缓了采后葡萄的腐败时间，提高了葡萄果实采后的可运输性。5 μmol/L NO处理对采后葡萄果实各生理指标的影响并不明显，30 μmol/L NO处理对葡萄果实表现出轻微毒害作用。15 μmol/L NO和冷藏能有效地保持采后葡萄果实的果实硬度，推迟可溶性糖、维生素C等各营养品质指标的降低时间，抑制活性氧含量和丙二醛含量的增加，从而保持果实风味，提高果实抗逆性。

Toll样受体能够识别细菌等病原微生物及介导炎症反应信号通路，在先天免疫和获得性免疫中发挥着重要作用。为了解Toll样受体2（TLR2）在小尾寒羊正常乳腺组织及由金黄色葡萄球菌引起的乳腺炎乳腺组织中的表达情况，探讨TLR2在金黄色葡萄球菌乳腺炎致病过程中的作用机制及乳腺上皮细胞在乳腺免疫防御中所起的作用，采用qRT-PCR技术和免疫组织化学染色（IHC）法检测了正常小尾寒羊及金黄色葡萄球菌乳腺炎病理模型小尾寒羊乳腺组织中TLR2基因mRNA及其蛋白的表达情况。结果显示，小尾寒羊正常乳腺组织、金黄色葡萄球菌感染乳腺组织均有TLR2 mRNA及其蛋白表达；但金黄色葡萄球菌感染后乳腺组织中TLR2基因及TLR2蛋白显著高于正常乳腺组织，且感染后48 h TLR2 mRNA和TLR2蛋白相对表达量最高（P<0.05），96 h TLR2 mRNA和蛋白相对表达量较48 h显著降低（P<0.05），正常对照组TLR2的相对表达量最低。通过免疫组织化学染色发现，正常乳腺组织中TLR2蛋白主要定位于乳腺腺泡上皮，而感染金黄色葡萄球菌后乳腺组织中TLR2蛋白主要表达在乳腺腺泡腔中脱落的乳腺上皮细胞和以淋巴细胞为主的炎性细胞上。结果表明，乳腺感染金黄色葡萄球菌后，乳腺上皮细胞是病原菌作用的靶标，通过上调表达TLR2识别病原菌，激发先天免疫。

为了解VvMSA基因的功能,以抗性葡萄品种Vidal Blanc组培苗为试材,克隆得到VvMSA基因,对其序列进行了生物信息学分析,并利用实时定量PCR分析了其组织表达特性和多种非生物胁迫和信号应答表达特性。结果表明,VvMSA基因片段大小为450bp,编码149个氨基酸序列。生物信息学分析结果显示,VvMSA蛋白分子量约为16.703kDa,等电点为5.68,不稳定系数为41.71,推测为不稳定蛋白。VvMSA含有65个氨基酸组成的ABA/WDS保守结构域。在进化上属于单独一个分支,它和已报道过的番茄LeASR1分别属于同一个祖先进化出的2个分支。实时荧光定量PCR分析显示,VvMSA在葡萄不同组织中均有表达,花中表达量最高。多种逆境胁迫因子如盐、干旱和低温等能诱导VvMSA不同程度的上调表达,盐胁迫3h时诱导表达量最高。同时,VvMSA受逆境胁迫信号分子NO和H₂S不同程度诱导表达上调,而SA则抑制VvMSA表达。激素ABA、GA₃、IAA和ET均能不同程度诱导VvMSA表达上调,并且VvMSA盐处理下的表达模式与ABA诱导的类似。综合以上结果推断VvMSA可能通过调控ABA信号途径来调节葡萄对盐胁迫应答。

为了研究葡萄抗逆基因(CAN70200.1)的表达特性,采用PCR技术从葡萄中克隆了CAN70200.1基因上游一段长度为1354 bp的启动子片段,命名为P_CAN。采用PlantCARE和PLACE启动子在线预测工具分析表明,P_CAN启动子序列具有CAAT-box、TATA-box基本的顺式作用元件和一些参与非生物胁迫、光和植物激素应答相关的顺式作用元件。为验证启动子的表达特性,将P_CAN启动子连接到pCAMBIA1391Z载体GUS基因的上游,构建成植物表达载体p1391Z-CAN,并通过农杆菌介导法转化烟草,经PCR鉴定,获得转基因植株。对转基因烟草植株进行逆境胁迫处理发现,在干旱处理120 min后,P_CAN启动子活性达到最强;而4℃低温处理30~60 min时,P_CAN启动子活性达到最强,表明P_CAN启动子具有低温和干旱胁迫诱导表达特性。