草莓

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贲海燕, 郝永娟, 霍建飞, 姚玉荣, 高苇, 王万立

2022, 37(6): 182-190. https://doi.org/10.7668/hbnxb.20193522

摘要 (112) RichHTML (3) PDF全文 (59)

由羽衣草单囊壳菌引起的草莓白粉病是保护地草莓发病面积较大、发病频率较高的草莓病害之一,从苗期到结果期都能发生危害。建立快速、简便、高效的草莓白粉病病原菌检测技术对于该病的有效诊断和防控尤为重要。以羽衣草单囊壳菌ITS基因保守序列为靶基因,设计了1组包括F3/B3、FIP/BIP和LF/LB的环介导等温扩增(LAMP)特异性引物,通过实时荧光曲线和荧光显色双重判定方法,对体系中影响检测效率的主要因素dNTPs、MgSO₄、BstDNA聚合酶、甜菜碱及温度进行优化,并对优化后的方法进行特异性、灵敏性检测及田间样本检测效果评估。结果表明,建立了草莓白粉病菌LAMP检测体系后,其优化的dNTPs终浓度为1.6 mmol/L,MgSO₄终浓度为8 mmol/L,BstDNA聚合酶终浓度为320 U/moL,甜菜碱终浓度为1.2 mmol/L,反应最佳温度为65 ℃。该方法能够特异性地检测出草莓白粉病病原菌,检测灵敏度达到3.2×10^-4 ng/μL,最低检测浓度可在1 h内完成,效率是普通PCR的100倍。通过LAMP荧光显色法进行草莓白粉病田间样品检测,可有效地检测草莓白粉病发病症状不明显的初侵染样本。该方法具有检测时间短、肉眼直接观察结果、对操作人员要求低、检测成本低等优点,对于草莓白粉病早期诊断、监测,提早预防、确定最佳防治时间具有重要的指导意义。

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基于SLAF-seq技术构建栽培草莓高密度遗传图谱

董辉, 杨莉, 李莉, 张建军, 范婧芳, 宋世佳, 杨雷, 李海山

2020, 35(6): 52-57. https://doi.org/10.7668/hbnxb.20191341

摘要 (397) RichHTML PDF全文 (260)

为大量开发SNP用于构建栽培草莓高质量的遗传图谱，以国产草莓品种红星为母本，日本草莓品种红颜为父本构建F₁群体，采用SLAF-seq技术和HighMap软件，对2个亲本和200个F₁子代群体进行高通量测序、SNP标记的开发及高密度遗传图谱的构建。通过高通量测序，共获得565 919 066 reads，平均质量Q30为95.36%，平均GC含量为39.68%，样本GC分布正常。通过生物信息学分析，共获得717 881个SLAF标签，2 136 939个SNP标记，其中有56 237个SNP为高质量标记可用于遗传图谱标记的定位和构建。共构建了28个连锁群，总图距为4 022.16 cM，该图SNP标记14 412个，完整度为99.84%，标记间的平均距离为0.28 cM。通过对遗传图谱单体来源进行评估，结果表明每个个体中较大区段均来源于亲本；通过连锁关系热图对相邻标记间的连锁关系进行分析，结果表明，每个连锁群上的大部分标记顺序与基因组保持一致，标记顺序正确，图谱质量高。这是栽培草莓中首次采用SLAF-seq技术构建的高密度SNP遗传图谱，为栽培草莓的遗传研究和分子标记辅助育种奠定了基础。

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草莓生长素响应基因FvIAA17的克隆及表达分析

苏丽艳

2019, 34(4): 46-52. https://doi.org/10.7668/hbnxb.201751591

摘要 (376) RichHTML PDF全文 (92)

Aux/IAA蛋白作为转录抑制因子在植物生长发育过程中有重要的调控作用。为了研究草莓生长素诱导基因FvIAA17在草莓生长发育过程中的功能，以森林草莓为试验材料，克隆草莓FvIAA17基因，并对其序列特征进行生物信息学分析，利用Real-time PCR技术分析了FvIAA17在草莓不同组织及外源激素处理下的表达模式。结果表明，FvIAA17基因开放阅读框为594 bp，编码197个氨基酸；预测其分子质量和等电点分别为21.85 ku和7.56，具有Aux/IAA家族蛋白典型结构域和保守序列；该基因启动子区含有脱落酸、茉莉酸甲酯及胁迫相关的顺时作用元件。进化分析表明，FvIAA17基因与苹果生长素诱导基因MdIAA1亲缘关系最近；亚细胞定位预测分析表明，FvIAA17蛋白定位于周质内。Real-time PCR结果表明，FvIAA17基因表达量受到外源激素IAA、ABA的显著诱导，说明该基因可能参与了生长素、脱落酸调控草莓发育的信号转导过程。本研究为后继研究草莓FvIAA17的功能和作用机制提供参考依据。

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草莓FvARF5基因的克隆、生物信息学及表达分析

苏丽艳

2019, 34(3): 16-22. https://doi.org/10.7668/hbnxb.201751324

摘要 (309) RichHTML PDF全文 (119)

生长素响应因子ARF是一类新的转录因子，通过激活或抑制生长素响应基因的表达调控植物的生长发育过程。为解析草莓生长素响应因子FvARF5在草莓形成过程中的功能，以草莓为试验材料，克隆了FvARF5基因并进行了生物信息学分析，利用qPCR分析了FvARF5在草莓不同组织及植物激素处理下的表达模式。结果表明，FvARF5基因开放阅读框为2 745 bp，编码914个氨基酸，蛋白质分子质量为100.65 ku，等电点为5.25。多序列比对和系统进化树分析表明，FvARF5基因具有保守的B3 DNA结合结构域和生长素响应因子保守结构域，与蔷薇科月季ARF5基因的进化关系最近，相似度达95%。亚细胞定位预测分析表明，FvARF5蛋白定位于细胞核中。启动子分析显示，FvARF5基因具有多样化的激素应答元件。qPCR结果表明，FvARF5存在组织表达差异，在茎和绿果中表达量较高。另外，FvARF5基因表达受到生长素和赤霉素的诱导，初步推测该基因可能参与了生长素和赤霉素调控草莓果实的形成过程。为进一步研究FvARF5基因的功能奠定基础。

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草莓新品种石莓10号营养品质分析

董辉, 杨莉, 杨雷, 李莉, 张建军, 范婧芳

2017, 32(S1): 125-129. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2017.S1.022

摘要 (313) RichHTML PDF全文 (49)

为了对加工型草莓新品种石莓10号营养品质进行分析及评价，以石莓10号为试验材料，并以当前主栽加工品种达赛莱克特为对照，测定了石莓10号和达赛莱克特的一般营养成分、活性营养成分、色泽、质构以及芳香成分。结果表明，石莓10号的灰分、可溶性固形物、固酸比分别为0.68%±0.21%，7.53%±0.06%，9.41±0.23，显著高于达赛莱克特（P<0.05），具有良好的口感。两者的抗坏血酸含量均较高，在50.00 mg/100g左右，无明显区别（P>0.05）；石莓10号的花色苷含量显著高于达赛莱克特（P<0.05），高达35.78 mg/100g，活性成分含量丰富。石莓10号果实表面色泽为深红色，亮度指数L^*明显低于达赛莱克特（P<0.05）。石莓10号的硬度、弹性以及咀嚼性显著高于达赛莱克特（P<0.05），质构特性表现优异。检测的7种芳香成分中，石莓10号中己酸乙酯等5种酯类物质均优于达赛莱克特，香气比较浓郁。由此可见，石莓10号具有良好的营养品质，可作为优良的加工品种应用于生产中。

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草莓轻型黄边病毒外壳蛋白抗原表位预测

邓子兵, 马建忠, 王永刚, 杨菊梅, 魏艳, 潘博, 李印武

2016, 31(S1): 106-111. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2016.S1.019

摘要 (348) RichHTML PDF全文 (75)

抗原表位是抗体识别并结合抗原的部位。抗原表位的预测有助于重组抗原的设计、快速筛选和高活性抗原的快速制备。通过DNAStar、ExPASy、TMHMM Sever2.0和IEDB等软件对草莓轻型黄边病毒的外壳蛋白的二级结构、理化及生物学性质进行了分析。分析结果显示，草莓轻型黄边病毒的外壳蛋白中不存在跨膜区域；平均亲水性为-0.252，属于可溶性蛋白；潜在的抗原表位有5个，平均抗原指数为0.026 5~0.077 3。预测的上述5个抗原表位是否有抗原活性及其活性强弱仍有待于相应的试验论证。

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草莓分子指纹图谱构建与应用

宋慧, 沈岚, 张香琴

2015, 30(S1): 196-199. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2015.S1.035

摘要 (717) RichHTML PDF全文 (129)

为了对草莓品种进行分子鉴定,以草莓品种红颊、章姬、宁馨(香莓)、阿尔比和梦香为试验材料,从112个RAPD引物中筛选出4个差异引物,扩增出5个差异位点进行指纹图谱构建和聚类分析.RAPD揭示供试草莓材料的多态性比例为3.6%. 应用指纹图谱标记能够鉴定红颊、阿尔比和梦香等推广品种,构建宁玉和香蕉等新增草莓品种的指纹图谱,发现梦香的变异群体.最后讨论了草莓指纹图谱的适用性和品种聚类分析对制定推广计划的指导作用.

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三种DNA提取方法对检测草莓镶脉病毒稳定性的研究

冉策, 陈柳, 陆家兰, 刘正坪, 魏艳敏, 赵晓燕, 尚巧霞

2015, 30(3): 200-204. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2015.03.034

摘要 (453) RichHTML PDF全文 (485)

草莓成熟叶片中含有大量的多糖、蛋白质、多酚和色素等物质,影响高质量DNA的提取和下游PCR反应的进行。为确定适用于PCR技术检测草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的DNA提取方法,从草莓叶片中提取DNA后,对样品中的SVBV进行特异性的PCR检测,比较确定不同DNA提取方法对PCR检测SVBV稳定性的影响。以感染SVBV的草莓叶片为材料,分别采用CTAB试剂盒法、高盐低pH法、改良SDS法提取草莓叶片的总DNA,将不同方法提取的DNA通过紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法进行测定,对DNA产量和质量进行分析。结果表明,3种方法均能获得较为完整的DNA片段,用CTAB试剂盒提取的DNA质量最高,改良SDS法提取的DNA质量较低。将不同方法提取的DNA经过PCR反应特异性检测SVBV后,将与目的片段大小一致的PCR扩增产物经序列测定及分析,证明与SVBV的序列相吻合,证明了方法的可靠性,其质量能够满足PCR特异性检测需要。

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RNA干扰技术抑制草莓FaEtr2基因表达的研究

宋春丽, 马俊莲, 唐霞, 张子德, 赵丛枝, 李静

2014, 29(1): 28-30. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2014.01.006

摘要 (395) RichHTML PDF全文 (195)

采用RNA干扰技术抑制草莓乙烯受体基因表达,以延缓草莓成熟软化进程。以测序质粒为模板,PCR扩增草莓FaEtr2基因片段。双酶切正、反义PCR产物及表达载体,将酶切产物定向连接到pBI121载体上,构建成该基因的shRNA(Short hairpin RNA)表达载体,由此转录的mRNA因两端序列反向互补而成发夹式RNA,可应用于RNA干扰的研究。将构建好的载体转化根癌农杆菌LBA4404,用基因工程菌菌液浸染千代田草莓组培苗叶片,用卡那霉素筛选抗性植株。PCR检测和GUS组织化学染色检测到4个株系的转基因植株。

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草莓果实重要性状动态规律研究

杨雷, 杨莉, 李莉, 李海山, 郝保春

2010, 25(S1): 96-99. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2010.S1.022

摘要 (277) RichHTML PDF全文 (426)

为了弄清草莓的果实生长发育规律以及营养成分的变化动态规律,本试验以达赛莱克特、石莓4号、石莓5号和石莓6号为试材,研究了草莓果实从谢花后3d到成熟果实生长发育规律和主要营养成分的变化规律。结果表明:果实纵横径在整个生长发育过程中一直是平稳增长;不同品种果实重量和体积均在花后15d左右开始迅速膨大;含糖量在草莓果实发育过程中总体上呈上升趋势,从白果期至成熟迅速增加;果实白果前可滴定酸呈增长趋势,白果期后开始下降;在果实的发育过程中维生素C含量表现出上升的趋势,至转红期达到最大,成熟时略有降低。

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草莓果实若干数量性状的遗传分析研究

杨雷, 杨莉, 李莉, 郝保春

https://doi.org/10.7668/hbnxb.2009.S2.021

摘要 (306) RichHTML PDF全文 (341)

对8个草莓杂交组合F₁的181个株系的果实主要数量性状进行了测定和统计分析, 研究和探讨了草莓果实主要数量性状的遗传倾向。结果表明:果实一级序果果重、二级序果果重、最大果重、可溶性固形物含量、果实硬度、维生素C含量均为多基因控制的数量性状, 呈连续变异。F₁果实一级果重、二级果重、最大果重、果实可溶性固形物含量、维生素C含量都呈现出趋小变异, 果实硬度呈现出增大的趋势, 趋向变大。

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草莓乙烯受体FaEtr2基因植物表达载体构建

宋春丽, 赵丛枝, 马俊莲

2010, 25(6): 71-73. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2010.06.013

摘要 (313) RichHTML PDF全文 (223)

为通过转基因技术改善草莓的贮运性能,以全明星草莓为试材,克隆了与草莓成熟有关的FaEtr2基因的2个片段,并构建了该基因的反义和正义植物表达载体。根据已克隆的草莓乙烯受体FaEtr2基因序列及表达载体pBI221上的酶切位点设计2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增到2个全明星草莓FaEtr2基因片段。两片段经双酶切消化后分别以正、反两个方向插入到植物表达载体pBI221的35 S启动子和NOS终止子之间,分别构建成All Star-FaEtr2基因的正、反义植物表达载体。

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检测草莓果中多组分的新方法──近红外光谱法

金同铭, 崔洪昌

1994, 9(2): 120-123. https://doi.org/10.3321/j.issn:1000-7091.1994.02.024

摘要 (284) RichHTML PDF全文 (350)

用近红外光谱法（NIRs）分析草莓中的蔗糖，葡萄糖、果糖、柠檬酸、苹果酸和维生素C等6种成分，与高效液相色谱法（HPLC）的测值相比较，其相关系数分别为0.9920、0.9914、0.9888、0.9954、0.9949和0.9980，标准误差为0.021、0.035、0.065、0.044、0.029、0.727.说明NIRs法与HPLC法的准确度相似。由于此法具有快速、非破坏、样品不需要预处理、不用昂贵的化学试剂等优点，可以在草莓的品质分析、品种质量检验中推广应用。

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苗期不同营养液处理对草莓产量形成的影响

谭学文

1996, 11(4): 123-125. https://doi.org/10.3321/j.issn:1000-7091.1996.04.025

摘要 (214) RichHTML PDF全文 (654)

在DFT栽培条件下，研究了草莓苗期不同营养液处理对定植后草莓产量形成的影响。试验结果表明，苗期断肥处理能增加草莓前期产量和总产量，苗期营养液浓度1.0mS/cm较0.5mS/cm有利于草莓产量形成。试验结果还表明，不同草莓品种对苗期营养液处理具有相同的适应性，草莓品种春香宜作为水培草莓品种。

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草莓果实主要数量性状变异及相关性研究

杨莉, 李莉, 孙丽敏, 杨雷, 杨秋叶, 刘铁铮, 郝保春

2005, 20(3): 22-24. https://doi.org/10.3321/j.issn:1000-7091.2005.03.006

摘要 (279) RichHTML PDF全文 (350)

Baidu(29)

以露地栽培的82份草莓品种（系）为材料，对其主要数量性状的变异、分布规律及相关性进行了研究和分析。结果表明，草莓果实硬度、可溶性固形物、平均单果重、最大单果重和单株产量基本呈正态分布，不同性状的变异不同；果实硬度与平均单果重、单株产量分别呈显著正相关和极显著正相关，平均单果重与最大单果重及单株产量均呈极显著正相关，最大单果重与单株产量呈极显著正相关。此研究为草莓育种的亲本选配和杂交后代预先选择提供了依据。

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全明星草莓乙烯受体Ers1基因克隆及序列分析

刘思思, 马俊莲, 唐霞, 张子德, 宋春丽

2011, 26(5): 46-49. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2011.05.010

摘要 (413) RichHTML PDF全文 (280)

克隆了与草莓成熟有关的乙烯受体Ers1基因片段,为进一步研究Ers1基因功能并通过基因技术改善草莓贮运性能奠定基础。以全明星草莓成熟果实中分离得到基因组DNA为模板,经PCR扩增到一条约700 bp的特异片段,将该片段克隆到PEGM-T easy vector上经测序分析,基因全长667 bp,编号222个氨基酸。序列分析结果表明,该序列与Chandler-Ers1的cDNA序列同源性99%,氨基酸序列同源性98%。

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草莓组培快繁及叶片诱导植株再生的研究

孙瑞芬, 李天然, 李堃, 邓香兰, 石慧芹, 张颖力, 贾利敏

2002, 17(4): 49-53. https://doi.org/10.3321/j.issn:1000-7091.2002.04.011

摘要 (380) RichHTML PDF全文 (826)

以4个草莓品种的匍匐茎尖为起始材料,试验以MS为基本培养基附加不同激素草莓茎尖诱导植株再生、增殖、生根的培养基,确立了草莓组培快繁技术方法;又以4个草莓品种的组培苗叶片为外植体,探讨了不同激素配比、基因型对诱导草莓不定芽再生的影响;通过进一步试验,以MS+B有机为基本培养基附加6-BA 2.23 mg/L、IAA 1.72 mg/L,探讨草莓不同基因型及不同外植体对诱导不定芽再生的影响,初步建立了一个有效的、较高频率的芽再生系统,也为基因的转化找到一个较好的受体材料.

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草莓果实含水量对品质的影响

刘明池, 小岛孝之, 田中宗浩, 陈杭

2002, 17(3): 114-117. https://doi.org/10.3321/j.issn:1000-7091.2002.03.023

摘要 (380) RichHTML PDF全文 (936)

将土壤水分控制在不同水平,获得了130个不同含水量的果实.分析表明:随着果实含水量的减少,果实大小、滴定酸含量降低,可溶性总糖、糖酸比、色相和硬度增加.在提高糖含量的过程中,蔗糖、葡萄糖和果糖提高的幅度并不一样,从而改变了3种单糖占可溶性总糖的比例.果实含水量与果实Brix、糖酸比的相关系数为-0.71和-0.61.

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千代田草莓乙烯受体Etr2基因克隆及序列分析

宋春丽, 马俊莲, 唐霞, 张子德, 刘永巨

2008, 23(6): 46-49. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2008.06.010

摘要 (322) RichHTML PDF全文 (320)

克隆了与草莓成熟有关的乙稀受体FaEtr2基因片段，为进一步研究FaEtr2基因功能并通过基因技术改善草莓贮运性能奠定基础。以千代田草莓成熟果实中分离到的基因组DNA为模板，经PCR扩增到1条约1.0 kb的特异片段，将该片段克隆到pGEM－T easy vector上经测序分析，基全长共1 09 bp，编号39个氨基酸残基。序列分析结果表明，该序列与Chandler－Etr2的cDNA序列同源性99%、氨基酸序列同源性为98%。

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甲基磺酸乙酯对草莓愈伤组织的生理效应

周厚成, 罗静, 赵霞, 王永清

2008, 23(3): 138-142. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2008.03.033

摘要 (236) RichHTML PDF全文 (415)

Baidu(27)

用不同浓度甲基磺酸乙酯对草莓愈伤组织进行诱变处理,测定了愈伤组织中的保护酶和氧化酶活性、总酚含量、MDA含量的变化以及愈伤组织的死亡率。结果表明,随着EMS处理浓度的增加和时间的延长,愈伤组织死亡率呈上升趋势;随着EMS处理浓度的增加,保护酶SOD,CAT和氧化酶PPO,POD活性升高,而后快速下降;随着处理时间的延长,SOD活性逐渐下降,CAT,PPO活性先上升后下降,POD活性则表现为先降后升再降;随着处理浓度的增加和时间的延长,总酚含量变化为先升后降,但上升和下降都比较缓慢,而MDA含量则逐渐上升;处理后的愈伤组织在培养过程中,PPO,POD活性迅速下降并维持在相对稳定的水平,总酚和MDA含量逐渐下降,而总酚含量与PPO,POD活性呈显著正相关。由此认为,在用EMS对草莓愈伤组织进行诱变时,较适宜的剂量为0.1%~0.2%浓度处理1.0~1.5 h,在处理完成后的前12 h培养中,应采取措施以减轻褐变。

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全明星草莓乙烯受体Etr1基因克隆及序列分析

汪丽, 马俊莲, 唐霞, 张子德, 宋春丽

2010, 25(5): 68-71. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2010.05.014

摘要 (280) RichHTML

Baidu(8)

克隆了与草莓成熟有关的乙烯受体Etr1基因片段,为进一步研究Etr1基因功能并通过基因技术改善草莓贮运性能奠定基础.以全明星草莓成熟果实中分离到得基因组DNA为模板,经PCR扩增到一条约600 bp的特异片段,将该片段克隆到pEGM-T easy vector上经测序分析,基因全长61 bp,编码205个氨基酸.序列分析结果表明,该序列与Chandler-Etr1的cDNA序列同源性98%,氨基酸序列同源性9%.

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水杨酸对水分胁迫下草莓幼苗膜脂过氧化的影响

刘艳, 陈贵林, 李晓燕, 刘景秀

2010, 25(5): 127-131. https://doi.org/10.7668/hbnxb.2010.05.026

摘要 (257) RichHTML PDF全文 (319)

研究水杨酸在诱导植物抗旱性形成中的作用.以草莓幼苗为试材,采用不同浓度外施水杨酸预处理,测定水分胁迫下各处理草莓叶片膜脂过氧化相关指标,保护酶类活性和光合特性.水分胁迫下,未施水杨酸的草莓叶片活性氧出现一高一低2个峰值,第1个峰值之后保护酶类活性显著提高,膜脂过氧化指标维持较低水平;随着胁迫时间延长,活性氧再次小幅积累,膜脂过氧化程度随之加剧.适宜浓度水杨酸预处理可以促进水分胁迫下活性氧的早期积累,并有效激活保护酶活性,减轻膜脂过氧化损伤,叶片维持高光合活性;但高浓度水杨酸预处理会加剧膜脂过氧化损伤.水杨酸通过促进活性氧信号泵发,活化保护酶活性,减轻膜脂过氧化损伤来提高植物对水分胁迫的抗性.

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草莓CO同源基因FaCO-2的克隆及表达分析

刘月学, 邹冬梅, 李贺, 张志宏, 马跃, 代红艳

2012, 27(4): 1-6. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-7091.2012.04.001

摘要 (410) RichHTML PDF全文 (285)

以草莓（Fragaria×ananassa Duch．）品种花姬为试材，通过PCR和RT-PCR方法克隆出草莓CO同源基因FaCO-2的CDS和DNA全长序列，在此基础上通过实时定量PCR的方法检测了其在草莓植株各组织和花器官中的表达。结果表明，该基因DNA序列长度为1882bp，含1个内含子，其CDS长度为1 146bp，编码382个氨基酸，与其他物种的CO同源基因氨基酸序列有较高的同源性，生物信息学分析表明该蛋白分子量为42021．69D，等电点pI=5．49。实时定量RT-PCR结果表明，在不同的组织、花器官中，FaCO-2的表达量存在差异，在充分展开的较大叶片中的表达量最高；在4轮花器官中，只在萼片中表达，而其他花器官中不表达。

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草莓轻型黄边病毒CP基因的克隆、序列分析及原核表达

于翠梅, 张志宏, 刘月学, 马跃, 李贺, 代红艳

2012, 27(1): 30-34. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-7091.2012.01.006

摘要 (403) RichHTML PDF全文 (362)

克隆草莓轻型黄边病毒CP基因,并构建其原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达CP蛋白。利用SMYEV的检测引物,通过RT-PCR技术筛选带SMYEV的草莓植株;根据NCBI中SMYEV序列设计扩增CP基因全长引物,通过RT-PCR获得SMYEV沈阳分离物CP基因全长序列;将CP基因克隆到原核表达pGEX-6P-1上,利用IPTG诱导CP基因在大肠杆菌BL21(DE3) 中表达蛋白。利用RT-PCR扩增获得SMYEV分离物SY05的CP基因全长序列,由729个核苷酸组成,编码242个氨基酸残基。SY05与其他SMYEV分离物的核苷酸同源性为80.1%～97.4%,氨基酸同源性为92.1%～99.6%,其中,与SMYEV分离物SY03的氨基酸一致性为98.3%。将SY05的CP基因成功克隆到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建了重组表达载体p6P-EV-CP,并将其导入大肠杆菌BL21(DE3) 中。SDS-PAGE分析表明,IPTG诱导SMYEV分离物SY05的CP基因在大肠杆菌中表达出分子量为52.0 kDa的融合蛋白。克隆出SMYEV分离物SY05的CP基因,实现了其在原核细胞中的表达,为SMYEV抗血清的制备奠定了重要基础。

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