蓖麻子叶节遗传转化研究

doi:10.3969/j.issn.1000-7091.2012.04.021

华北农学报 ›› 2012, Vol. 27 ›› Issue (4): 112-117. doi: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.04.021

蓖麻子叶节遗传转化研究

刘鹏^1，2，3, 张立军¹, 张春兰⁴, 黄凤兰^3，4, 李国瑞^3，4, 陈永胜^3，4

1. 沈阳农业大学生物科学技术学院, 辽宁沈阳110866;
2. 内蒙古民族大学农学院, 内蒙古通辽028042;
3. 内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术研究中心, 内蒙古通辽028042;
4. 内蒙古民族大学生命科学学院, 内蒙古通辽028042

出版日期:2012-08-28
作者简介:刘鹏（1973-），男（蒙古族），内蒙古赤峰人，副教授，博士，主要从事分子生物学研究。
基金资助:
国家自然科学基金项目（31060194）;内蒙古自然科学基金项目（2011MS0512）;内蒙古自治区高等学校科学研究项目（NJZY11201）

Study on Genetic Transformation of Castor （Ricinus communis L. ） Using Cotyledonary Node from Mature Seeds

LIU Peng^1，2，3, ZHANG Li-jun¹, ZHANG Chun-lan⁴, HUANG Feng-lan^3，4, LI Guo-rui^3，4, CHEN Yong-sheng^3，4

1. College of Biological Science and Technology, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, China;
2. College of Agriculture, Inner Mongolia University for Nationalities, Tongliao 028042, China;
3. Engineering Research Center of Castor at Universities of Inner Mogolia Autonomons, Tongliao 028042, China;
4. School of Life Science, Inner Mongolia University for Nationalities, Tongliao 028042, China

Published:2012-08-28

摘要/Abstract

摘要： 利用前期构建的P450基因的RNAi植物表达载体侵染蓖麻受体材料，旨在获得转P450基因的阳性株。以蓖麻品种通蓖5号为试验材料，利用根癌农杆菌介导法转化蓖麻子叶节，研究影响子叶节遗传转化的若干因素。结果表明：子叶节对Kan较为敏感，适宜筛选质量浓度为250mg／L；外植体预培养2—3d，侵染用农杆菌菌液OD600=0．8，侵染时间10min，共培养3d，可获得较高的遗传转化效率。再生植株经PCR和Southern Blot检测，证明为转基因植株。

关键词: 蓖麻, 子叶节, 遗传转化

Abstract: In order to gain positive strains of transgenic using pre-built RNAi expression vector infection castor receptor material. In this study,several factors affecting transformation rate were studied by Agrobacterium mediated in Tong bi No. 5 castor. The results showed that ： cotyledonary node of castor were rather sensitive to kanamycin, and corresponding concentration was 250 mg/L. The pre-cuhure time of 2 - 3 days, the bacterial concentration of OD600=0.8 was the best inoeulum density and 10 minutes was the best inoculation time,co-culture for 3 days were bene- ficial to improve transformation frequency. The PCR and Southern blot analysis proved that the target gene was suc- essfully integrated into the genome of castor.

Key words: Castor, Cotyledonary node, Genetic transformation

中图分类号:

S565.6

刘鹏, 张立军, 张春兰, 黄凤兰, 李国瑞, 陈永胜. 蓖麻子叶节遗传转化研究[J]. 华北农学报, 2012, 27(4): 112-117. doi: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.04.021.

LIU Peng, ZHANG Li-jun, ZHANG Chun-lan, HUANG Feng-lan, LI Guo-rui, CHEN Yong-sheng. Study on Genetic Transformation of Castor （Ricinus communis L. ） Using Cotyledonary Node from Mature Seeds[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2012, 27(4): 112-117. doi: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.04.021.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2012/V27/I4/112

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