基于农杆菌介导法的植物转基因载体的改造

doi:10.7668/hbnxb.2011.01.009

华北农学报 ›› 2011, Vol. 26 ›› Issue (1): 41-46. doi: 10.7668/hbnxb.2011.01.009

所属专题： 生物技术；

基于农杆菌介导法的植物转基因载体的改造

钟鸣, 黄国涛, 白丽萍, 张丽, 马慧, 张立军, 郭志富

沈阳农业人学生物科学技术学院，辽宁省农业生物技术重点实验室，辽宁沈阳110866

收稿日期:2010-11-23 出版日期:2011-02-28
作者简介:钟鸣(1971－ )，女，辽宁沈阳人，副教授，农学博士，主要从事植物基因工程的研究工作。黄国涛与钟鸣同等贡献。
基金资助:
国家自然科学基金项目(3090089431070448)；辽宁省教育厅科研计划项目(L2010486)

New Strategy to Reconstruct Agrobacterium}nediated Plant Transgenic Expression Vectors

ZHONG Ming, HUANG Guo-tao, BAI Li-ping, ZHANG Li, MA Hui, ZHANG Li-jun, GUO Zhi-fu

Key Laboratory of Agricultural Biotechnology of Liaoning Province, College of Biology Science and Technology, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, China

Received:2010-11-23 Published:2011-02-28

摘要/Abstract

摘要： 根据植物转基因载体的特点和局限性，利用几种商业化载体进行克隆、酶切和重组，从而重构方便快捷的转基因植物表达载体。首先用PCR方法从pCAMBIA1301质粒中扩增到含启动子CaM35S、完整GusA基因和终止子NOS三部分的片段，经TA克隆重组入pGM-T载体中获得pGM-35S-GUS-NOS重组质粒。然后对来源于新疆沙冬青的抗寒基因AnGPAT片段和pGM-35S-GUS-NOS重组质粒进行双酶切，连接获得中间载体pGM-35S-GPAT-NOS。再对中间载体和双元真核表达载体pCAMBIA2300双酶切后连接，转化入大肠杆菌和农杆菌。经PCR、酶切及测序鉴定后确认得到改造后的植物表达载体p2300-35S-GPAT-NOS。结果表明，这是一种简便、高效、通用、经济的载体重构策略。

关键词: 转基因, 表达载体, 载体改造, 新策略

Abstract: According to the characteristics and limitations of plant transgene vectors the and transgenic plant ex-pression vectors were reconstructed by cloning digestion and recombination in the base of the existing commercial vec-torn. First design primers and amplify the gene fragments which were composed of CaM35S promoter.

Key words: Transenic, Expression vector, Vector transformation, New strategy

中图分类号:

S188

钟鸣, 黄国涛, 白丽萍, 张丽, 马慧, 张立军, 郭志富. 基于农杆菌介导法的植物转基因载体的改造[J]. 华北农学报, 2011, 26(1): 41-46. doi: 10.7668/hbnxb.2011.01.009.

ZHONG Ming, HUANG Guo-tao, BAI Li-ping, ZHANG Li, MA Hui, ZHANG Li-jun, GUO Zhi-fu. New Strategy to Reconstruct Agrobacterium}nediated Plant Transgenic Expression Vectors[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2011, 26(1): 41-46. doi: 10.7668/hbnxb.2011.01.009.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2011/V26/I1/41

[1]	司比努尔·牙生江, 者玉琦, 钟金城, 武志娟, 柴志欣. *九龙牦牛ELOVL3基因克隆、真核表达载体构建及组织表达谱分析*[J]. 华北农学报, 2025, 40(2): 201-209.
[2]	桑莹莹, 李珊珊, 鲍薇, 徐东, 张雪, 赵艳. 大豆P34蛋白基因启动子克隆及其调控活性分析[J]. 华北农学报, 2025, 40(1): 22-28.
[3]	姚梦瑶, 李娟, 刘志刚, 蔡大润, 李晓荣, 李波, 杨洋, 王子轩, 王勇攀, 陈勋基, 耿洪伟, 陈果. *玉米ZmMPI基因克隆及其过表达转基因株系检测*[J]. 华北农学报, 2024, 39(4): 1-9.
[4]	刘娟, 冯玉梅, 韩冰, 邢燕平, 李淑芬, 杨燕. *小麦株高相关基因TaGAMyb-B在水稻中的功能研究*[J]. 华北农学报, 2023, 38(3): 42-48.
[5]	王莹, 王晓宇, 孙德慧, 霍红雁, 刘海臣, 徐惠, 张继星. 蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因克隆与表达分析[J]. 华北农学报, 2023, 38(2): 85-92.
[6]	陈静, 胡蓉, 刘勇, 秦艺, 熊兴华. *甘蓝型油菜BnaFIL基因启动子的克隆与表达分析*[J]. 华北农学报, 2022, 37(3): 53-59.
[7]	杨小贝, 陈二永, 李成伟. *棉花GaLMI1-like基因功能及其启动子表达分析*[J]. 华北农学报, 2022, 37(3): 27-36.
[8]	赵惠英, 杨光凯, 高燕, 张小军, 郝燕燕. *苹果MdSGR2基因克隆及植物超表达载体构建*[J]. 华北农学报, 2022, 37(2): 42-48.
[9]	岳润清, 刘璐, 铁双贵, 徐心志, 陈娜娜. *转Cry1Ab-t基因玉米YA108的获得及其抗虫性鉴定*[J]. 华北农学报, 2021, 36(2): 212-218.
[10]	丁超杰, 关园园, 李成伟. 小麦miR395a前体克隆、遗传转化及组织表达模式分析[J]. 华北农学报, 2020, 35(4): 52-56.
[11]	邢蔓, 洪波, 张泽荣, 张曦予, 陈拓, 吴宁柔, 官梅, 邬贤梦, 官春云, 熊兴华. Napin启动子特异性表达油菜BnGPAT9基因[J]. 华北农学报, 2020, 35(4): 1-7.
[12]	李论, 柯杰, 黄钢, 刘红诗, 宋燕妮, 张英洁, 陈利红. *过表达二穗短柄草BdDREB1-like基因提高烟草的抗氧化能力*[J]. 华北农学报, 2020, 35(2): 1-8.
[13]	陈倩, 杨尚谕, 卓维, 李佳皓, 彭双, 王静, 李立芹. *烟草中蛋白激酶基因NtCIPK3的表达载体构建及表达分析*[J]. 华北农学报, 2018, 33(6): 80-87.
[14]	李云富, 江敏, 宁慧宇, 张丙林, 邹华文, 吴忠义. ZmLTP3基因对玉米的遗传转化及耐盐性鉴定[J]. 华北农学报, 2018, 33(3): 1-6.
[15]	李嘉明, 孙健, 张明辉, 冷月, 孙琦, 赵宏伟, 邹德堂. *水稻OsAMTR310基因的克隆与在干旱胁迫下的功能分析*[J]. 华北农学报, 2018, 33(3): 44-49.

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