基于琼脂糖凝胶电泳的小麦SSR扩增体系优化

doi:10.7668/hbnxb.2009.06.035

华北农学报 ›› 2009, Vol. 24 ›› Issue (6): 174-177. doi: 10.7668/hbnxb.2009.06.035

所属专题： 小麦；

基于琼脂糖凝胶电泳的小麦SSR扩增体系优化

李勇¹, 牛永春²

1. 中国医学科学院, 北京协和医学院药用植物研究所,北京 100193;
2. 中国农业科学院, 农业资源与农业区划研究所,北京 100081

收稿日期:2009-10-11 出版日期:2009-12-28
通讯作者: 牛永春(1957-),男,河南人,研究员,博士,博士生导师,主要从事植物病理和真菌学研究。
作者简介:李勇(1976-),男,河北衡水人,副研究员,博士,主要从事植物分子生物学及病害生物防治研究.
基金资助:
国家重点基础研究发展规划项目(2006CB100203)

Optimization of SSR Amplification System and Agarose Gel Electrophoresis of Amplificons

LI Yong¹, NIU Yong-chun²

1. Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agriculture Sciences, Beijing 100193, China;
2. Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100193, China;
3. Institute of Agricultural Resources and Regional Planning, Chinese Academy of Agriculture Sciences, Beijing 100081, China

Received:2009-10-11 Published:2009-12-28

摘要/Abstract

摘要： 以小麦基因组DNA为试验材料,探索SSR扩增反应中5种反应组分(模板DNA、dNTPs、引物、Mg⁽²⁺⁾和Taq DNA聚合酶)对SSR扩增结果的影响.研究发现,引物、Mg⁽²⁺⁾和Taq DNA聚合酶对PCR扩增结果的影响最显著,其次是模板DNA,dNTP对PCR扩增结果的影响不明显.此外,借助该优化的SSR反应体系,对小麦7B染色体上的多对SSR引物进行了多态性筛选.试验结果表明,优化的SSR扩增体系结合高浓度琼脂糖凝胶能够对显性或差异显著的共显性标记进行高效分离.

关键词: 小麦, SSR, 分子标记

Abstract: In this study,effect of five reaction components,including template DNA,dNTPs,primer,Mg⁺and Taq DNA polymerase,on the SSR amplification results were studied using wheat genomic DNA as PCR template.Mg+and Taq DNA polymerase showing most significant influence on PCR products,and then is template DNA,dNTPs have no significant effect on it.Furthermore,SSR markers on wheat chromosome 7B were screened by the optimized SSR system.Results indicated that,dominant SSR markers or codominant markers with significant difference on length can be separated by optimized SSR amplification system and high concentration agarose gel effectively.

Key words: Wheat, SSR, Molecular marker

中图分类号:

S512.03

李勇, 牛永春. 基于琼脂糖凝胶电泳的小麦SSR扩增体系优化[J]. 华北农学报, 2009, 24(6): 174-177. doi: 10.7668/hbnxb.2009.06.035.

LI Yong, NIU Yong-chun,. Optimization of SSR Amplification System and Agarose Gel Electrophoresis of Amplificons[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2009, 24(6): 174-177. doi: 10.7668/hbnxb.2009.06.035.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2009/V24/I6/174

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