<em>PuCAT/Bar</em>抗逆抗除草剂基因共转化紫花苜蓿的研究

doi:10.7668/hbnxb.2017.S1.001

华北农学报 ›› 2017, Vol. 32 ›› Issue (S1): 1-6. doi: 10.7668/hbnxb.2017.S1.001

所属专题： 生物技术；

PuCAT/Bar抗逆抗除草剂基因共转化紫花苜蓿的研究

任伟^1,2, 王嘉莹³, 任华华³, 王英哲¹, 王梦寒³, 徐安凯¹

1. 吉林省农业科学院, 吉林长春 130124;
2. 中国科学院水利部水土保持研究所, 陕西杨陵 712100;
3. 吉林农业大学, 吉林长春 130118

收稿日期:2017-09-12 出版日期:2017-12-28
通讯作者: 徐安凯(1959-),男,吉林蛟河人,研究员,博士,主要从事牧草育种研究。
作者简介:任伟(1984-),男,河北石家庄人,助理研究员,博士,主要从事牧草逆境分子生物学与转基因研究。
基金资助:
吉林省自然科学基金项目（20150101111JC）；吉林省科技攻关计划（20160203011NY）；国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目（CARS-35-02）

Co-transformation of Puccinellia chinampoensis PuCAT Gene and Bar Gene into Alfalfa with Agrobacterium-mediated Method

REN Wei^1,2, WANG Jiaying³, REN Huahua³, WANG Yingzhe¹, WANG Menghan³, XU Ankai¹

1. Jilin Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130124, China;
2. Institute of Soil and Water Conservation, Chinese Academy of Sciences, Yangling 712100, China;
3. Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China

Received:2017-09-12 Published:2017-12-28

摘要/Abstract

摘要： 为了提高紫花苜蓿的抗盐碱能力，利用盐生植物碱茅的PuCAT基因成功构建了p3300-35S-PuCAT-NOS植物表达载体，以Bar基因为筛选标记基因，通过农杆菌介导转化公农5号紫花苜蓿子叶，并对其遗传转化体系进行了优化（预培养、菌液浓度、侵染时间、共培养、抗生素浓度），经草铵膦筛选获得72株抗性植株，用PCR检测和RT-PCR鉴定，最终获得30株RT-PCR阳性植株。结果表明，PuCAT基因已经整合在苜蓿基因组中，并且能够在RNA水平上表达。

关键词: 紫花苜蓿, PuCAT, 转基因植物, 农杆菌介导, 盐碱胁迫

Abstract: In order to improve the salt and alkali tolerance of alfalfa,the plant expression vector p3300-35S-PuCAT -NOS was constructed and transformed into alfalfa via Agrobacterium mediated. The selectable marker gene was Bar gene. And the genetic transformation system was optimized,including:pre-incubation time,bacteria concentration,inoculation time,co-cultivation time and antibiotic concentration. The transformed plants were selected with glufosinate ammonium. 30 transformed plants were identified as positive in the gene expression by PCR and RT-PCR which suggested that the PuCAT gene had been integrated into the genome of the regenerated plants.

Key words: Alfalfa, PuCAT gene, Transgenic plants, Agrobacterium mediated, Salt and alkali stress

中图分类号:

Q78
S551.03

任伟, 王嘉莹, 任华华, 王英哲, 王梦寒, 徐安凯. PuCAT/Bar抗逆抗除草剂基因共转化紫花苜蓿的研究[J]. 华北农学报, 2017, 32(S1): 1-6. doi: 10.7668/hbnxb.2017.S1.001.

REN Wei, WANG Jiaying, REN Huahua, WANG Yingzhe, WANG Menghan, XU Ankai. Co-transformation of Puccinellia chinampoensis PuCAT Gene and Bar Gene into Alfalfa with Agrobacterium-mediated Method[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2017, 32(S1): 1-6. doi: 10.7668/hbnxb.2017.S1.001.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2017/V32/IS1/1

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