含<em>GmNHX1</em>和<em>LcVP1</em>双价基因植物表达载体构建与转基因棉花的获得

doi:10.7668/hbnxb.2014.04.010

华北农学报 ›› 2014, Vol. 29 ›› Issue (4): 56-62. doi: 10.7668/hbnxb.2014.04.010

所属专题： 棉花；生物技术；

含GmNHX1和LcVP1双价基因植物表达载体构建与转基因棉花的获得

冯雪, 贾永红, 郭红珍, 张一名, 赵学良, 孙艳香

廊坊师范学院遗传与育种研究所, 河北廊坊 065000

收稿日期:2014-03-12 出版日期:2014-08-28
通讯作者: 孙艳香（1970-），女，河北廊坊人，教授，博士，主要从事植物遗传学与基因工程教学和研究。
作者简介:冯雪（1978-），女，河北霸州人，讲师，硕士，主要从事植物分子生物学与基因工程教学和研究。
基金资助:
河北省自然科学基金项目（C2010001804）；河北省高等学校科学技术研究项目（20070318）；廊坊师范学院博士基金项目（LSZB200903）；廊坊师范学院自然科学重点项目（LSZZ201102）

Construction of Plant Expression Vector with GmNHX1 and LcVP1 Dual-gene and Obtaining Transgenic Cotton

FENG Xue, JIA Yong-hong, GUO Hong-zhen, ZHANG Yi-ming, ZHAO Xue-liang, SUN Yan-xiang

Institute of Genetics and Breeding, Langfang Normal University, Langfang 065000, China

Received:2014-03-12 Published:2014-08-28

摘要/Abstract

摘要： 应用DNA重组技术将编码大豆液泡膜Na⁺/H⁺反向转运蛋白GmNHX1和百脉根液泡膜H⁺-PPase LcVP1的开放阅读框片段同时构建在pCambia1301载体中，形成p1301-GmNHX1-LcVP1 双价耐盐基因植物表达载体。以Coker 312棉花品种的胚性愈伤组织为外植体，采用根癌农杆菌介导法将其转入棉花中，并利用潮霉素筛选获得抗性植株。对抗性植株的T₁幼苗进行分子和生理指标检测，表明外源基因已成功整合到棉花基因组中，并不同程度地提高了转基因株系耐盐能力。

关键词: 棉花, 耐盐, 大豆液泡膜Na⁺/H⁺反向转运蛋白GmNHX1, 百脉根液泡膜H⁺-PPaseLcVP1, 遗传转化

Abstract: By use of DNA recombination method,a vector,p1301-GmNHX1-LcVP1, harboring two open reading frames of soybean tonoplast Na⁺/H⁺ antiporter GmNHX1 and Lotus corniculatus H⁺-PPase LcVP1,was constructed through sequential restriction digests and ligations recombination.The two genes driven by CaMV 35S promoters were successfully transferred into cotton cultivars Coker 312 via Agrobacterium with hygromycin selection system.The molecular and physiological analysises of T₁ generation indicated that genes were integrated into the cotton genome and enhanced transgenic cotton salt tolerance.

Key words: Cotton, Salt tolerance, Soybean tonoplast Na⁺/H⁺ antiporter GmNHX1, Lotus corniculatus H⁺-PPase LcVP1, Genetic transformation

中图分类号:

Q78
S562.03

冯雪, 贾永红, 郭红珍, 张一名, 赵学良, 孙艳香. 含GmNHX1和LcVP1双价基因植物表达载体构建与转基因棉花的获得[J]. 华北农学报, 2014, 29(4): 56-62. doi: 10.7668/hbnxb.2014.04.010.

FENG Xue, JIA Yong-hong, GUO Hong-zhen, ZHANG Yi-ming, ZHAO Xue-liang, SUN Yan-xiang. Construction of Plant Expression Vector with GmNHX1 and LcVP1 Dual-gene and Obtaining Transgenic Cotton[J]. journal1, 2014, 29(4): 56-62. doi: 10.7668/hbnxb.2014.04.010.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2014/V29/I4/56

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