转<em>epsps-G6</em>基因棉花的Southern杂交及遗传特性分析

doi:10.7668/hbnxb.2018.03.004

摘要
图/表
参考文献
相关文章 (15)

全文: PDF (1019 KB) HTML
输出: BibTeX | EndNote (RIS)

摘要为鉴定epsps-G6基因成功导入棉花基因组并分析转基因抗草甘膦棉花的拷贝数和遗传特性，以花粉管通道法获得的8个转epsps-G6基因抗草甘膦棉花株系（G6-1、G6-4、G6-5、G6-7、G6-11、G6-19、G6-20、G6-25）为材料，通过Southern点杂交、双酶切和单酶切的Southern杂交后进行分析，结果表明，外源epsps-G6基因已成功整合到棉花基因组上，且其中4个转化株系含有单拷贝插入的epsps-G6基因。选用其中3个单拷贝插入、自交纯合且草甘膦抗性强的株系G6-1、G6-5、G6-19，分别与转基因遗传背景材料（中棉所49）和陆地棉标准系（TM-1）进行正反交，遗传分析结果表明，这3个转基因株系均符合3：1的孟德尔分离规律，不受细胞质效应的影响。

	服务

	把本文推荐给朋友
	加入我的书架
	加入引用管理器
	E-mail Alert
	RSS
	作者相关文章
	燕树锋
	许蒙蒙
	祝水金
	郭新海
	铁双贵

关键词 ：棉花； epsps-G6基因；草甘膦；除草剂；花粉管通道法

Abstract：In order to identify the epsps-G6 gene successfully introduced into the cotton genome and analyze the copy number and genetic characteristics of the transgenic glyphosate-resistant cotton,eight transformation events(G6-1,G6-4,G6-5,G6-7,G6-11,G6-19,G6-20,G6-25)obtained by the pollen tube pathway method were used as materials. The results of southern Dot Blotting,double and single digestion enzyme Southern hybridization indicated that the exogenous epsps-G6 gene had been successfully integrated into the cotton genome and that four of the transformants contained a single copy of epsps-G6 gene. Three homozygous lines(G6-1,G6-5,G6-19)by self-pollination,with a single copy insertions and high glyphosate resistance,were selected to reciprocal cross with genetic background cultivar CCRI-49 and genetic standard line TM-1. The results of genetic analysis suggested that the three transformation events were inconsistent with the Mendelian separation rule of 3:1,which was not influenced by the cytoplasmic effect.

Key words： Cotton ; epsps-G6 gene ; Glyphosate ; Herbicide ; Pollen tube pathway

收稿日期: 2018-02-24

S562.03

基金资助:转基因生物新品种培育重大专项（2014ZX08005-005）

通讯作者: 祝水金(1962-),男,浙江海盐人,教授,博士,主要从事棉花分子生物学研究。

作者简介: 燕树锋(1982-),男,河南汤阴人,助理研究员,博士,主要从事植物基因工程和分子育种研究。

引用本文:

燕树锋, 许蒙蒙, 祝水金, 郭新海, 铁双贵. 转epsps-G6基因棉花的Southern杂交及遗传特性分析[J]. 华北农学报, 2018, 33(3): 19-23. doi: 10.7668/hbnxb.2018.03.004.
YAN Shufeng, XU Mengmeng, ZHU Shuijin, GUO Xinhai, TIE Shuanggui. Analysis of Southern Blot and Genetic Character in Transgenic Cotton Expressing epsps-G6 Gene. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2018, 33(3): 19-23. doi: 10.7668/hbnxb.2018.03.004.

链接本文:

http://www.hbnxb.net/CN/10.7668/hbnxb.2018.03.004 或 http://www.hbnxb.net/CN/Y2018/V33/I3/19

[1] Liang C,Sun B,Meng Z,et al. Co-expression of GR79 EPSPS and GAT yields herbicide-resistant cotton with low glyphosate residues[J]. Plant Biotechnology Journal,2017,15(12):1622-1629.
[2] 赵锦慧,郭婕,胡彦民. 应用诱变法筛选玉米抗草甘膦突变株系的研究[J]. 河南农业科学,2011,40(4):49-52.
[3] Wang Y Y,Zhou Z L,Wang X X,et al. Genome-wide association mapping of glyphosate-resistance in Gossypium hirsutum races[J]. Euphytica,2016,209(1):209-221.
[4] 李世民,沈海龙,刘迪,等. 盛蕾期转基因抗草甘膦棉花对草甘膦的抗性研究[J]. 河南农业科学,2010,39(10):46-48.
[5] 王旭静,张欣,刘培磊,等. 复合性状转基因植物的应用现状与安全评价[J]. 中国生物工程杂志,2016,36(4):18-23.
[6] 温广月. 抗草甘膦作物研究进展[J]. 世界农药,2010,32(1):10-17.
[7] 燕树锋,刘海芳,铁双贵,等. 通过草甘膦浸种鉴定抗草甘膦棉花[J]. 分子植物育种,2016,14(3):604-607.
[8] 王慧,闫晓红,徐杰,等. 我国抗草甘膦基因的发掘现状[J]. 农业生物技术学报,2014,22(1):109-118.
[9] Dill G M. Glyphosate-resistant crops:history,status and future[J]. Pest Management Science,2005,61(3):219-224.
[10] 燕树锋,刘海芳,铁双贵,等. EPSPS外源基因对陆地棉农艺性状和纤维品质的影响[J]. 棉花学报,2015,27(5):489-493.
[11] 欧婷,何秋伶,陈进红,等. 基于抗草甘膦基因的棉花茎尖农杆菌介导转化方法的研究[J]. 棉花学报,2013,25(5):410-416.
[12] 周长发,张锐,张晓,等. 地高辛随机引物法标记探针的Southern杂交技术优化[J]. 中国农业科技导报,2009,11(4):123-128.
[13] 张晓,张锐,于源华,等. 基于DIG-化学发光法的Southern blot方法优化[J]. 生物技术通报,2011(9):205-210.
[14] 刘禄,牛焱焱,雷昊,等. 基于地高辛标记对小麦进行Southern杂交分析主要影响因素的优化和验证[J]. 植物遗传资源学报,2012,13(2):182-188.
[15] 王小丽,杜建中,郝曜山,等. 转BADH基因玉米植株的获得及其耐盐性分析[J]. 作物学报,2014,40(11):1973-1979.
[16] 王秀红, 史向远, 白建荣, 等. 抗草甘膦基因的玉米转化及后代遗传分析[J]. 华北农学报, 2011, 26(1):117-121.
[17] 王守才,王国英,丁群星,等. 转基因在玉米中的遗传分离与整合特性的研究[J]. 遗传学报,1999,26(3):254-261.
[18] 马盾,周小云,黄乐平. 花粉管通道法转基因棉花后代的遗传特性[J]. 西北农业学报,2008,17(3):147-149.
[19] 刘昭军,李铁,刘丽艳,等. 花粉管通道介导的抗除草剂基因(bar)对大豆的遗传转化[J]. 大豆科学,2007,26(3):310-314.
[20] 燕树锋,祝水金,刘海芳,等. 转EPSPS基因抗草甘膦棉花的遗传分析[J]. 华北农学报,2015,30(3):54-57.