一种植物总RNA的快速提取方法

doi:10.7668/hbnxb.2010.02.028

华北农学报 ›› 2010, Vol. 25 ›› Issue (2): 140-144. doi: 10.7668/hbnxb.2010.02.028

一种植物总RNA的快速提取方法

刘芬¹, 于秀梅², 刘大群³

1. 河北农业大学生命科学学院, 河北保定 071001;
2. 河北农业大学生命科学学院, 河北保定 071001;
3. 河北农业大学植物保护学院, 河北保定 071001;河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心, 河北保定 071001

收稿日期:2009-12-24 出版日期:2010-04-28
通讯作者: 刘大群(1958-),男,河北灵寿人,教授,博士,主要从事植物病害生物防治和分子植物病理学研究;于秀梅(1976-),女,黑龙江肇源人,讲师,博士,主要从事生物化学与分子生物学研究。
作者简介:刘芬(1981-),女,山东东阿人,硕士,主要从事生物化学与分子生物学研究.
基金资助:
国家自然科学基金(30771391);河北省教育厅课题基金(2009130)

A Protocol for Rapid Isolation of Total RNA from Plant Tissues

LIU Fen¹, YU Xiu-mei², LIU Da-qun³

1. College of Life Science, Agricultural University of Hebei, Baoding 071001, China;
2. College of Plant Protection, Agricultural University of Hebei, Baoding 071001, China;
3. Biological Control Centre of Plant Diseases and Plant Pests of Hebei Province, Baoding 071001, China

Received:2009-12-24 Published:2010-04-28

摘要/Abstract

摘要： 为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiquitin的表达情况进行分析。扩增结果表明,选定的各持家基因在叶锈菌侵染不同时间的小麦叶片中的表达量并不一致,且各基因在小麦叶片中的丰度也存在差异。通过对几种基因的扩增,进一步证实该方法能够满足一般分子生物学下游操作的要求,是一种理想的植物总RNA提取方法。

关键词: 植物, 总RNA提取, 持家基因, 小麦, RT-PCR

Abstract: In order to check the quality of total RNA isolated by NaAc/ethanol precipitation,total RNA of radicle,young leaves,young stems,immature seeds from wheat and flowers from different plant genus were extracted and checked.The results showed that total RNA obtained had good integrity and high purity.And the expression profiles of four frequently used house-keeping genes(GAPDH,Actin,Rubisco,Ubiqutin)were analyzed by normalization with Tubulin gene.The results of the amplification showed that the transcripts of the selected house-keeping genes were different at different time points of wheat leaves inoculated by leaf rust pathogens,moreover,the copy numbers of each house-keeping gene were inconsistent in wheat leaves.PCR amplification shows that NaAc/ethanol precipitation can meet with demands of down stream experiment of common molecular biology and is an ideal method of plant total RNA extraction.

Key words: Plant, Extraction of total RNA, House-keeping genes, Wheat, RT-PCR

中图分类号:

刘芬, 于秀梅, 刘大群. 一种植物总RNA的快速提取方法[J]. 华北农学报, 2010, 25(2): 140-144. doi: 10.7668/hbnxb.2010.02.028.

LIU Fen, YU Xiu-mei, LIU Da-qun,. A Protocol for Rapid Isolation of Total RNA from Plant Tissues[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2010, 25(2): 140-144. doi: 10.7668/hbnxb.2010.02.028.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2010/V25/I2/140

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