芥菜植株原位真空渗入遗传转化方法的研究

doi:10.3321/j.issn:1000-7091.2004.03.003

华北农学报 ›› 2004, Vol. 19 ›› Issue (3): 8-12. doi: 10.3321/j.issn:1000-7091.2004.03.003

芥菜植株原位真空渗入遗传转化方法的研究

金万梅¹, 巩振辉², 吕元红²

1. 西北农林科技大学, 园艺学院, 陕西杨凌 712100;
2. 北京市农林科学院林业果树研究所, 北京 100093

收稿日期:2004-03-29 出版日期:2004-09-28
作者简介:金万梅(1971-),女,硕士,助理研究员,主要从事植物遗传转化研究;巩振辉为通讯作者.
基金资助:
国家自然科学基金项目(39770522);陕西省自然科学基金项目(2001SM11);陕西省农业分子生物学重点实验室基金资助项目的部分内容

Studies on the Technique of in planta Agrobacterium-mediated Gene Transfer by Vacuum Infiltration in Brassica juncea

JIN Wan-mei¹, GONG Zhen-hui², LU Yuan-hong²

1. College of Horticulture, Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry, Yangling712100, China;
2. Institute of Forestry and Pomology, Beijing Academy of Agricultureand Forestry Science, Beijing 100093, China

Received:2004-03-29 Published:2004-09-28

摘要/Abstract

摘要： 以蕾期的芥菜生态型雪里蕻和圆叶芥为试材,在携带潮霉素磷酸转移酶标记基因的根癌农杆菌菌株GV3101的介导下,对影响芥菜植株原位真空渗入遗传转化效果的真空渗入时间、根癌农杆菌悬浮孢子的浓度、渗入培养基、感染方式以及根癌农杆菌菌株等进行研究.结果表明,真空渗入时间为2 min/间歇30s/30s;菌液浓度OD600为0.8;渗入培养基为1/2MS无机+B有机;菌株采用强感染型的;对花蕾进行真空渗入,可以获得最佳转化效果.

关键词: 植株原位真空渗入法, 遗传转化, 根癌农杆菌, 芥菜

Abstract: In bud stage of mustards(Brassica juncea Coss) ecotype Xuelihong and Yuanyejie were trans-formed with in planta vacuum infiltration by an Agrobacterium tumefaciens strain GV3101 carrying hy-gromycin resistance gene. Effects of different factors on transformation frequency with in planta vacuum infil-tration were studied. The best transformation frequency was obtained in the following conditions, the vacuum infiltration time was 2 min/intermission 30s/30s，the concentration of Agrobacterium cells was ODboo 0.8，in-filtration medium was 1/2MS inorganic composition and BS organic composition, and in bud stage the buds were treated by the vacuum infiltration.

Key words: In planta vacuum infiltration, Genetic transformation, Agrobacterium tumefaciens, rassica uncea

中图分类号:

S634.4

金万梅, 巩振辉, 吕元红. 芥菜植株原位真空渗入遗传转化方法的研究[J]. 华北农学报, 2004, 19(3): 8-12. doi: 10.3321/j.issn:1000-7091.2004.03.003.

JIN Wan-mei, GONG Zhen-hui, LU Yuan-hong. Studies on the Technique of in planta Agrobacterium-mediated Gene Transfer by Vacuum Infiltration in Brassica juncea[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2004, 19(3): 8-12. doi: 10.3321/j.issn:1000-7091.2004.03.003.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2004/V19/I3/8

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