猪Fc&gamma;RⅢ和&gamma;链共转染Marc-145细胞系的建立

doi:10.7668/hbnxb.2011.01.002

华北农学报 ›› 2011, Vol. 26 ›› Issue (1): 6-10. doi: 10.7668/hbnxb.2011.01.002

所属专题： 畜牧；

猪FcγRⅢ和γ链共转染Marc-145细胞系的建立

邬成业¹, 史平玲², 乔松林¹, 王爱萍², 郝慧芳¹, 杜晓明², 王林林², 张改平¹

1. 河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室河南省动物免疫学重点实验室，河南郑州450002;
2. 郑州人学生物工程系，河南郑州450001

收稿日期:2010-10-12 出版日期:2011-02-28
作者简介:邬成业 (1981－ )，男，河南信阳人，在读硕士，主要从事细胞生物学研究。
基金资助:
国家自然科学基金项目(30730068)

Establishment of Marc}45 Cell Line Transfected with the Porcine FcyR11I and Gamma Chain

WU Cheng-ye¹, SHI Ping-ling², QIAO Song-lin¹, WANG Ai-ping², HAO Hui-fang¹, DU Xiao-ming², WANG Lin-lin², ZHANG Gai-ping¹

1. Key Laboratory of Animal Immunology of the Ministry of Agriculture, Henan Provincial Key Laboratory of Animal Immunology, Henan Academy of Agriculture Sciences, Zhengzhou 450002, China;
2. Department of Bioengineering, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China

Received:2010-10-12 Published:2011-02-28

摘要/Abstract

摘要： 为了建立稳定表达猪FcγRⅢ(PorcineFcgammareceptorⅢ，poFcγRⅢ)的Marc-145细胞系，从PAM细胞中提取总RNA，应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅢ和γ链的cDNA，并构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅢ真核表达质粒；用脂质体共转染Marc-145细胞，经潮霉素B(300mg/L)和G418(400mg/L)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系；运用RT-PCR、玫瑰花环试验和流式细胞术对细胞系进行了鉴定。结果表明，成功构建了猪FcγRⅢ和γ链真核表达载体，建立了稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系，表达于转染细胞表面的猪FcγRⅢ受体分子能与猪IgG特异结合。

关键词: 猪Fc&gamma, RⅢ受体, &gamma, 链, 共转染, Marc145细胞

Abstract: The objective of the present study is to establish the Mare 45 cell line that stably expresses porcinepo.The total RNA was extracted from porcine alveolar macro-phage (PAM)，they were inserted into the eukaryot-is expression vectors.The expression of poFcyRIII on transfected cells was verifiedthrough RTCR resetting test and FCM.The eukaryotic expression vectors were successfully constructed .

Key words: poFcyR receptor, y chain, Coransfection, Marc45 cell line

中图分类号:

S828
S852.4

邬成业, 史平玲, 乔松林, 王爱萍, 郝慧芳, 杜晓明, 王林林, 张改平. 猪FcγRⅢ和γ链共转染Marc-145细胞系的建立[J]. 华北农学报, 2011, 26(1): 6-10. doi: 10.7668/hbnxb.2011.01.002.

WU Cheng-ye, SHI Ping-ling, QIAO Song-lin, WANG Ai-ping, HAO Hui-fang, DU Xiao-ming, WANG Lin-lin, ZHANG Gai-ping. Establishment of Marc}45 Cell Line Transfected with the Porcine FcyR11I and Gamma Chain[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2011, 26(1): 6-10. doi: 10.7668/hbnxb.2011.01.002.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2011/V26/I1/6

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