枯草芽孢杆菌BSD-2一种抗菌肽的分离纯化与鉴定

doi:10.7668/hbnxb.2011.06.038

华北农学报 ›› 2011, Vol. 26 ›› Issue (6): 201-206. doi: 10.7668/hbnxb.2011.06.038

枯草芽孢杆菌BSD-2一种抗菌肽的分离纯化与鉴定

胡瑞萍^1,2,4, 张铎³, 张丽萍^1,4, 张根伟^1,4, 张蕾^1,4, 赵宝华²

1. 河北省科学院生物研究所, 河北石家庄 050081;
2. 河北师范大学生命科学学院, 河北石家庄 050016;
3. 河北化工医药职业技术学院, 河北石家庄 050062;
4. 河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心, 河北石家庄 050081

收稿日期:2011-06-15 出版日期:2011-12-28
通讯作者: 张丽萍(1969-)女，河北沽源人，研究员，硕士，主要从事农业微生物学研究;赵宝华(1967-)，男，河北衡水人，教授，博士，主要从事兽医微生物学研究。
作者简介:胡瑞萍(1982-)，女，河北邯郸人，硕士，主要从事应用微生物学研究。
基金资助:
河北省自然科学基金项目(C2009001280);河北省科学院重大攻关项目(11310)

Purification and Identification of an Antimicrobial Peptides from Bacillus subtilisBSD-2

HU Rui-ping^1,2,4, ZHANG Duo³, ZHANG Li-ping^1,4, ZHANG Gen-wei^1,4, ZHANG Lei^1,4, ZHAO Bao-hua²

1. Institute of Biology of Hebei Academy of Sciences, Shijiazhuang 050081, China;
2. College of Life Sciences of Hebei Nomal University, Shijiazhuang 050016, China;
3. Hebei Chemical and Pharmaceutical College, Shijiazhuang 050026, China;
4. The Microbial Control Enginearing Technology Ressearch Center of Main Crops Diseases in Hebei Province, Shijiazhuang 050081, China

Received:2011-06-15 Published:2011-12-28

摘要/Abstract

摘要： 为了分离纯化及鉴定枯草芽孢杆菌BSD-2代谢产物中抗菌肽,采用盐酸沉淀、Sephadex G-50层析以及反相HPLC对其进行分离纯化,并利用Tricine-SDS-PAGE、MAIDL-TOF-MS、红外光谱和核磁共振技术对其分子量、氨基酸序列以及结构进行初步解析。结果显示该抗菌肽是由29个氨基酸组成,分子量为3 514 Da,等电点为10.46。红外光谱和核磁共振分析其结构中含有-CH2-、-CH3、-OH、-NH2、-CH、-CO-以及苯环等官能团。

关键词: 枯草芽孢杆菌, 抗菌肽, 生物自显影, 红外光谱, 核磁共振

Abstract: In order to purify and identify an Antimicrobial peptides from the metabolic products of the Bacillus subtilis BSD-2． It was purified by Hydrochloric acid precipitation，Sephadex G-50 Chromatography and RT-HPLC． And the molecular weight was determined by Tricine-SDS-PAGE and Bioautography． The amino acid sequence and structure were preliminary analysised by MAIDL-TOF-MS， Infrared spectrum and nuclear magnetic resonance． The result indicated that the antimicrobial substance was composed of 29 amino acids． The molecular weight and PI were 3 514 Da and 10． 46 respectively． The structure contained a lot of functional groups by infrared spectrum and NMR， such as-CH2-，-CH3 ，-OH，-NH2 ，-CH，-CO-and so on．

Key words: Bacillus subtilis, Antibiotic peptide, Bioautography, Infrared spectrum, NMR

中图分类号:

Q939． 95

胡瑞萍, 张铎, 张丽萍, 张根伟, 张蕾, 赵宝华. 枯草芽孢杆菌BSD-2一种抗菌肽的分离纯化与鉴定[J]. 华北农学报, 2011, 26(6): 201-206. doi: 10.7668/hbnxb.2011.06.038.

HU Rui-ping, ZHANG Duo, ZHANG Li-ping, ZHANG Gen-wei, ZHANG Lei, ZHAO Bao-hua. Purification and Identification of an Antimicrobial Peptides from Bacillus subtilisBSD-2[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2011, 26(6): 201-206. doi: 10.7668/hbnxb.2011.06.038.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2011/V26/I6/201

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