牛<em>GDF-9</em>基因的克隆与组织表达的分析

doi:10.7668/hbnxb.2007.04.016

华北农学报 ›› 2007, Vol. 22 ›› Issue (4): 67-70. doi: 10.7668/hbnxb.2007.04.016

所属专题： 畜牧；生物技术；

牛GDF-9基因的克隆与组织表达的分析

田蕾¹, 刘永斌^1,2, 王峰^1,2, 田春英², 刘美霞³, 达赖², 祁云霞¹, 董文杰¹, 荣威恒², 孙洪深⁴

1. 内蒙古农业大学动物科学与医学学院, 内蒙古呼和浩特 010018;
2. 内蒙古农牧业科学院, 内蒙古呼和浩特 010030;
3. 内蒙古医学院第二附属医院, 内蒙古呼和浩特 010010;
4 山东省巨野县畜牧局, 山东巨野 274900

收稿日期:2007-03-30 出版日期:2007-08-28
通讯作者: 刘永斌(1977-)，男，内蒙古人，在读博士，主要从事分子生物学与动物育种研究工作。
作者简介:田蕾(1982-)，女，内蒙古太仆寺旗人，硕士，主要从事分子遗传学与牛羊育种研究工作。
基金资助:
内蒙古科技攻关项目(20040102);内蒙古自然科学基金资助项目(200607010410);畜禽种质资源项目(2005DKA21101)

The Clone and Tissue Expression of Bovine Growth Differentiation Factors-9 Gene

TIAN Lei¹, LIU Yong-bin^1,2, WANG Feng^1,2, TIAN Chun-ying², LIU Mei-xia³, DA Lai², QI Yun-xia¹, DONG Wen-jie¹, RONG Wei-heng², SUN Hong-shen⁴

1. College of Animals Science and Medicine, Inner Mongolia Agriculture University, Huhhot 010018, China;
2. Inner Mongolia Academy of Agriculture and Husbandary Sciences, Huhhot 010030, China;
3. The Second Accessory Hospital, Academy of Inner Mongolia Medicine Science, Huhhot 010010, China;
4. Juye Animal Bureau, Juye 274900, China

Received:2007-03-30 Published:2007-08-28

摘要/Abstract

摘要： 为了检测牛GDF-9基因mRNA在怀孕期牛生殖系统的表达情况，为GDF-9基因在雌性动物繁殖上的研究提供一定的理论依据。本试验根据GenBank中报道的牛GDF-9基因序列设计引物，从牛卵巢、输卵管、子宫、肾脏中提取RNA，采用RT-PCR技术进行cDNA扩增，扩增产物与载体pGM-T连接，转化大肠杆菌DH5α，筛选阳性克隆，测序。结果表明，已成功克隆的阳性重组子经测序鉴定其片段大小与预期大小完全一致，为26 bp。序列同源性分析比较表明，该cDNA及其推导的氨基酸序列与绵羊GDF-9cDNA和氨基酸序列同源性分别为97%和9%。以β-actin为内参照物，采用RT-PCR技术进行半定量分析，通过检测比较牛GDF-9基因在卵巢、输卵管、子宫、肾脏组织中mRNA的表达情况。结果表明，牛GDF-9基因在卵巢中表达量最高，在输卵管、子宫、肾脏中均有表达，但表达量不高。

关键词: 牛, GDF-9, RT-PCR, 克隆, mRNA, 表达

Abstract: In order to offer more theory of female reproductive performance, the expression of GDF-9 gene mRNA at the period of pregnaney bovine was detected. First, total RNA was isolated from the bovine ovaries, and the primers were designed according to the GenBank, cDNA was amplified with RT-PCR, then cloned into Excoli DH5α by using pGM-T vector. Sequence analysis showed that the cloned 264 bp cDNA and the deduced amino acid sequence shared 97% and 94% homology respectively with ovine GDF-9 cDNA. According to βactin as inner Criteria, then the mRNA of GDF-9 gene were examined with RT-PCR. The result indicated that GDF-9 expressed in the bovine ovaries, oviduct, uterus and kidney, and the largest is in ovaries.

Key words: Bovine, GDF-9, RT-PCR, Clone, mRNA expression

中图分类号:

S823.03

田蕾, 刘永斌, 王峰, 田春英, 刘美霞, 达赖, 祁云霞, 董文杰, 荣威恒, 孙洪深. 牛GDF-9基因的克隆与组织表达的分析[J]. 华北农学报, 2007, 22(4): 67-70. doi: 10.7668/hbnxb.2007.04.016.

TIAN Lei, LIU Yong-bin, WANG Feng, TIAN Chun-ying, LIU Mei-xia, DA Lai, QI Yun-xia, DONG Wen-jie, RONG Wei-heng, SUN Hong-shen. The Clone and Tissue Expression of Bovine Growth Differentiation Factors-9 Gene[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2007, 22(4): 67-70. doi: 10.7668/hbnxb.2007.04.016.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2007/V22/I4/67

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