一株产α-淀粉酶细菌的分离、鉴定及酶学性质初步研究

doi:10.3969/j.issn.1000-7091.2012.z1.050

华北农学报

一株产α-淀粉酶细菌的分离、鉴定及酶学性质初步研究

孙佑赫, 周开艳, 熊智

西南林业大学, 云南昆明 650224

收稿日期:2012-08-15 出版日期:2012-12-31
通讯作者: 熊智(1965 － ), 男, 重庆人, 教授, 博士, 主要从事微生物研究。
作者简介:孙佑赫(1984 － ), 男, 河北保定人, 在读硕士, 主要从事森林保护学研究。
基金资助:
国家自然科学基金(31100007)

Screening， Identification and Characterization of an α-amylase-Producing Bacillus subtilis 2N02

SUN You-he, ZHOU Kai-yan, XIONG Zhi

Southwest Forestry University,Kunming 650224,China

Received:2012-08-15 Published:2012-12-31

摘要/Abstract

摘要： 利用纯培养和碘液显色从松毛虫幼虫肠道中分离筛选得到一株产α-淀粉酶细菌2N02，通过16S rDNA序列比对，鉴定为枯草芽孢杆菌。摇瓶发酵后，产生的α-淀粉酶酶活力20.0 U/mL；经硫酸铵沉淀、透析脱盐后，初步研究酶学性质，测得酶反应最适温度50℃，最适pH值6.5，Mg²⁺、Ca²⁺对酶具有激活作用，Zn²⁺和EDTA则抑制酶活性。研究表明，该菌株是产α-淀粉酶较好的材料，具有一定的应用前景。

关键词: &alpha, -淀粉酶, 鉴定, 酶学性质

Abstract: An α-amylase-producing strain was isolated from Dendrolimu intestine by plating method and screening with iodine solution． The strain 2N02 was identified as Bacillus subtilis based on 16S ribosomal DNA sequencealignment analysis in the GenBank database． After shaking flask culture， the yield of α-amylase reached 20． 0U /mL． The enzyme properties of the strain were examined after ammonium sulfate precipitation and dialysis for desalting． The results showed that the optimum temperature and pH of the enzyme were 50 C and 6． 5 respectively， theenzyme activity was stimulated by Mg²⁺and Ca²⁺， while obviously inhibited by Zn²⁺and EDTA． This study provided a good experimental material for the further industrial utilization about α-amylase production．

Key words: α-amylase, Identification, Enzyme property

中图分类号:

TQ925

SUN You-he, ZHOU Kai-yan, XIONG Zhi. Screening， Identification and Characterization of an α-amylase-Producing Bacillus subtilis 2N02[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, doi: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.z1.050.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2012/V27/IS1/250

参考文献

[1] 张树政．酶工业制剂 ( 下册) [M]．北京: 科学出版社，1998: 458 － 489．
[2] 吴定, 邹耀洪, 王云, 等．固定化酶生产低聚异麦芽糖工艺研究[J]．食品科学, 2005, 26(3) : 125 － 127．
[3] 岳春, 初峰, 侯振建．液态法生产食醋工艺研究 [J]．食品工业科技, 2005, 26(3) : 113 － 115．
[4] 和田恭尚．酶在洗涤剂中的应用现状及展望[J]．日用化学工业, 2005, 35(1 ) : 30 － 35．
[5] 冯俊荣, 吕永红, 曲慧．饲用酶制剂在水产养殖中的应用[J]．水产科学, 2005, 24(3) : 40 － 41 ．
[6] 张强, 刘成君, 蒋芳, 等．耐高温 α-淀粉酶产生菌的分离鉴定及发酵条件与酶性质研究[J]．食品与发酵工业, 2005, 31 (2) : 34 － 37．
[7] Asghar M, Asad M J, Rehman S, et al．A Thermostable α-amylase from a Moderately Thermophilic Bacillus subtilisStrain for Starch Processing[J]．Jounal of Food Engineering, 2007, 79: 950 － 955．
[8] Zoe K, Maria L K．Thermostable α-amylase production byBacillus subtilis entrapped incalcium alginate gel capsules [J]．Enzymeand Microbial Technology, 2006 ( 39 ) : 690－ 696．
[9] 陈钧辉, 李俊, 张太平, 等．生物化学实验[M]．北京: 科学出版社, 2008: 250 － 251 ．
[10] Altschul S F, Gish W, Miller W, et al．Basic local alignment search tool [J]．Journal of Molecular Biology，1990, 215: 403 － 410．
[11] Thompson J D, Gibson T J, Plewniak F, et al．TheCLUSTAL-X windows interface: Flexible strategies formultiple sequence alignment aided by quality analysistools[J]．Nucleic Acids Res, 1997, 25; 4876 － 4882．
[12] Pvandamme P, Pot B, Gillis M．Polyphasic taxonomy, aconsensus approach to bacterial systematics[J]．Microbiology Review, 1996(60) : 407 － 438．
[13] Olsen G J, Woese C R．Ribosomal RNA: a key to phylogeny[J]．J FASEB, 1993, 7: 113 － 123．
[14] 郭建强, 李运敏, 岳丽丽, 等．超耐热酸性 α-淀粉酶基因的克隆及其在酵母细胞中的表达[J]．生物工程学报, 2006, 22(2) : 237 － 242．
[15] Mohsen F N, Dileep D, Deepti D, et al．Purification andcharacterization of an extracellular α-amylase from Bacillus subtilis AX20[J]．Protein Expression and Purification, 2005(41 ) : 349 － 354．
[16] Marco J L, Bataus L A, Valencia F F, et al．Purificationand characterization of a truncated Bacillus subtilis α-amylase produced by Escherichia coli[J]．Appl MicrobioBiotechnol, 1996(44) : 746 － 752．

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[2]	宿放, 韩佃刚, 叶玲玲, 张冲, 尹尚莲, 罗倩敏, 董仙兰, 李瑶瑶, 李凌枫, 艾军, 信吉阁. COVID-19病毒N基因在昆虫细胞内的表达[J]. 华北农学报, 2022, 37(5): 174-180.
[3]	凌晨, 赵洪, 颜军, 马莹雪, 冯艳芳, 张靖立, 李波, 邓超, 徐振江. 基于SSR标记的莴苣品种鉴定体系的建立及应用[J]. 华北农学报, 2022, 37(4): 34-44.
[4]	张辉, 王良, 付增娟, 李晓东, 赵尚敏, 鄂圆圆, 郑文哲, 张自强, 张必周, 张惠忠. VNTR特异性引物在甜菜育性鉴定中的应用[J]. 华北农学报, 2022, 37(2): 35-41.
[5]	张键, 王娜, 刘志达, 包婷婷, 张之为, 云晓鹏, 石必显, 张恒, 陈贵红, 陈燕芳, 赵君. 向日葵列当枯斑病病原菌的分离鉴定及致病力分化[J]. 华北农学报, 2022, 37(1): 172-180.
[6]	叶德友, 漆永红, 张化生. 角瓜与南方根结线虫非亲和互作相关MicroRNAs的鉴定[J]. 华北农学报, 2021, 36(S1): 333-340.
[7]	杨金睿, 王文倩, 王玥, 姚遥, 吉泽, 李俊逸, 陈斌, 肖关丽. 云南省4个主栽马铃薯品种叶片内生细菌多样性研究[J]. 华北农学报, 2021, 36(6): 178-188.
[8]	刘丹, 梁丹, 王从磊, 时晓伟, 许庆芬, 高杨, 候康波, 张欣, 冯刚, 王建贺. 小麦籽粒不同发育阶段醇溶蛋白表达谱分析及在种子纯度鉴定中的应用[J]. 华北农学报, 2021, 36(2): 68-73.
[9]	岳润清, 刘璐, 铁双贵, 徐心志, 陈娜娜. *转Cry1Ab-t基因玉米YA108的获得及其抗虫性鉴定*[J]. 华北农学报, 2021, 36(2): 212-218.
[10]	吕亮杰, 陈希勇, 张文英, 赵爱菊, 孙丽静, 张颖君, 刘玉平, 王莉梅, 李子千, 李辉. EMS诱变抗旱小麦冀麦418的突变体筛选与鉴定[J]. 华北农学报, 2020, 35(S1): 47-55.
[11]	刘晨, 王祯, 朱先约, 杨瑞, 倪博立. 苏云金芽孢杆菌的分离鉴定及伴孢晶体蛋白生物毒力效果分析[J]. 华北农学报, 2020, 35(S1): 355-362.
[12]	张康, 张凯, 王磊, 崔东安, 张景艳, 闫遵祥, 马雪青, 薛欢, 李建喜. 一株牛病毒性腹泻病毒BVDV-GSLY的分离鉴定[J]. 华北农学报, 2020, 35(S1): 378-384.
[13]	赵翔玥, 张二芹, 许倩茹, 马凡舒, 王雅楠, 牛香香, 李雪洋, 张申立, 张同旭, 邓瑞广, 张以芳, 张改平. 禽流感病毒H9N2亚型HA蛋白在水稻胚乳中的稳定、高效表达及活性鉴定[J]. 华北农学报, 2020, 35(4): 230-238.
[14]	邳瑞雪, 杜亮, 李娜, 栾维江, 李云海. *拟南芥突变体sus40-1D的遗传分析与候选基因鉴定*[J]. 华北农学报, 2020, 35(3): 63-68.
[15]	王俊, 董海冉, 常宏, 王伟, 包冬芳, 赵孝岳, 赵雪, 韩英鹏. *大豆异黄酮相关基因GmUGT73克隆及功能初步鉴定*[J]. 华北农学报, 2020, 35(2): 43-47.

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