简化一步多重RT-PCR法快速检测芜菁花叶病毒

doi:10.3969/j.issn.1000-7091.2012.03.020

华北农学报 ›› 2012, Vol. 27 ›› Issue (3): 102-107. doi: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.03.020

所属专题： 植物保护；

简化一步多重RT-PCR法快速检测芜菁花叶病毒

曾钢^1,2, 叶艳英^2,3, 闫晓红^2,4, 马荣才⁵, 唐乐尘¹, 姚磊²

1. 福建农林大学, 福建福州 350002;
2. 北京市农林科学院农业生物技术研究中心, 北京 100097;
3. 江西农业大学, 江西南昌 330045;
4. 内蒙古农业大学, 内蒙古呼和浩特 010018;
5. 北京市农业局, 北京 100029

收稿日期:2012-02-17 出版日期:2012-06-28
通讯作者: 姚磊(1968－), 男, 上海人, 副研究员, 博士, 主要从事植物生物学与生物技术研究。
唐乐尘(1948－), 男, 福建福州人, 教授, 主要从事植物保护研究。
作者简介:曾钢(1986－), 男, 河南南阳人, 在读硕士, 主要从事植物保护研究。
基金资助:
北京市自然基金(6092010);国家“863”计划项目(2008AA10Z154)

Quick Detection of Turnip Mosaic Virus by One-Step Multiple RT-PCR

ZENG Gang^1,2, YE Yan-ying^2,3, YAN Xiao-hong^2,4, MA Rong-cai⁵, TANG Le-chen¹, YAO Lei²

1. Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China;
2. Beijing Ago-Biotechnology Research Center, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing 100097, China;
3. Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045, China;
4. Inner Mongolia Agricultural University, Huhhot 010018, China;
5. Beijing Municipal Bureau of Agriculture, Beijing 100029, China

Received:2012-02-17 Published:2012-06-28

摘要/Abstract

摘要： 芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)是侵染十字花科作物和观赏性物种的主要病害之一。利用反转录酶M-MLV和普通Taq酶,使用一步法多重RT-PCR技术,建立了一种快速、简便、特异性强的检测TuMV的方法。该方法简便,不需先对总RNA提纯,只需室温下在提取液中对病样叶片直接碾磨,用粗提液或浓缩后的DNA-RNA混合物为模板进行检测。2套针对TuMV的特异性引物确保了检测的准确性。

关键词: 芜菁花叶病毒, 一步法, 多重RT-PCR, 病毒检测

Abstract: Turnip Mosaic virus(Turnip Mosaic virus，TuMV)infects and causes damage in many crucifers and?ornamentals. Using of M-MLV and general Taq enzyme，we developed a rapid，convenience and specificity method?for detecting of TuMV by one-step multiple RT-PCR. This simple method didn't need the step of purification of total?RNA. After grinding the samples directly in extraction buffer at room temperature，the crude extract or concentrated?DNA-RNA mixture could be used as detection template. In order to ensure the accuracy of the detection，two sets of?primers were employed in this method.

Key words: TuMV, One-step, Multiple RT-PCR, Virus detection

中图分类号:

S41.30
S43

曾钢, 叶艳英, 闫晓红, 马荣才, 唐乐尘, 姚磊. 简化一步多重RT-PCR法快速检测芜菁花叶病毒[J]. 华北农学报, 2012, 27(3): 102-107. doi: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.03.020.

ZENG Gang, YE Yan-ying,YAN Xiao-hong, MA Rong-cai, TANG Le-chen, YAO Lei. Quick Detection of Turnip Mosaic Virus by One-Step Multiple RT-PCR[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2012, 27(3): 102-107. doi: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.03.020.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2012/V27/I3/102

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