抗旱、耐盐基因<em>P5CS</em>植物表达双元载体的构建

doi:10.7668/hbnxb.2008.06.003

华北农学报 ›› 2008, Vol. 23 ›› Issue (6): 11-14. doi: 10.7668/hbnxb.2008.06.003

所属专题： 盐碱胁迫；抗旱节水；生物技术；

抗旱、耐盐基因P5CS植物表达双元载体的构建

程继东^1,2, 安玉麟¹, 孙瑞芬¹

1. 内蒙古农牧业科学院, 生物技术中心, 内蒙古, 呼和浩特, 010031;
2. 内蒙古农业大学, 农学院, 内蒙古, 呼和浩特, 010019

收稿日期:2008-06-20 出版日期:2008-12-28
通讯作者: 安玉麟(1954－)，男，内蒙古土默特右旗人，研究员，主要从事作物栽培、育种方面的研究。
作者简介:程继东(1979－)，男，内蒙古乌兰察布人，硕士，主要从事植物基因工程研究。
基金资助:
农业部“948”项目(2006-G23)

Construction of Drought and Salt Resistance Gene P5CS in Plant Expression Binary Vector

CHENG Ji-dong^1,2, AN Yu-lin¹, SUN Rui-fen¹

1. Biotechnology Research Center, Inner Mongolia Academy of Agriculture and Animal Husbandry Sciences, Huhhot 010031, China;
2. College of Agronomy, Inner Mongolia Agricultural University, Huhhot 010019, China

Received:2008-06-20 Published:2008-12-28

摘要/Abstract

摘要： 以含有P5CS的重组质粒pBIP5CS－F129A为模板，通过PCR的方法获得了目的基因P5CS(1905 bp)并将其克隆到pBS－T载体上。利用限制性核酸内切酶BamHⅠ和SalⅠ将P5CS基因从克隆载体上消化下来，定向插入到无GUS基因植物表达载体pCHF3的CaMV35S启动子和NOS终止子之间。通过冻融法将此表达载体导入农杆菌LBA0中，经PCR鉴定表明，P5CS基因植物表达双元载体构建成功。

关键词: 抗旱、耐盐基因, P5CS基因, 克隆, 植物表达载体

Abstract: The gene P5CS (1905 bp) was amplified via PCR using pBI P5CS-F129A plasmid as template and cloned into pBST vector. The Bam HⅠ/ SalⅠfragment from the recombinant plasmid pBST/P5CS was ligated directively between CaMV35S promotor and NOS terminater of the expression vector pCHF3 without GUS gene. The plant expression vector pCHF3/ P5CS was transfered into Agrobacterium tumefaciems strain LBA4404 by freeze-thaw method,and the expression binary plasmid was further identified by PCR. The results showed that pCHF3/P5CS vector was constructed successfully.

Key words: Drought,salt resistance gene, P5CSgene, Plant expression vector

中图分类号:

Q785

程继东, 安玉麟, 孙瑞芬. 抗旱、耐盐基因P5CS植物表达双元载体的构建[J]. 华北农学报, 2008, 23(6): 11-14. doi: 10.7668/hbnxb.2008.06.003.

CHENG Ji-dong, AN Yu-lin, SUN Rui-fen. Construction of Drought and Salt Resistance Gene P5CS in Plant Expression Binary Vector[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2008, 23(6): 11-14. doi: 10.7668/hbnxb.2008.06.003.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2008/V23/I6/11

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