根癌农杆菌介导的磨盘柿遗传转化体系的优化

doi:10.3321/j.issn:1000-7091.2007.02.015

华北农学报 ›› 2007, Vol. 22 ›› Issue (2): 56-59. doi: 10.3321/j.issn:1000-7091.2007.02.015

根癌农杆菌介导的磨盘柿遗传转化体系的优化

尹虹¹, 宋春丽², 马俊莲¹, 张子德¹, 唐霞¹

1. 河北农业大学食品科技学院, 河北保定 071001;
2. 河北农业大学中兽医学院, 河北定州 073000

收稿日期:2006-11-07 出版日期:2007-04-28
通讯作者: 马俊莲(1964-)，女，山西太原人，教授，博士，主要从事果蔬生物技术研究。
作者简介:尹虹(1981-)，女，山西河津人，在读硕士，主要从事果蔬采后生物技术研究。
基金资助:
河北省国际科技合作攻关项目(04395501D-3)

Optimization of Agrobacterium tumefaciens Mediated Genetic Transformation System of Mopanshi

YIN Hong¹, SONG Chun-li², MA Jun-lian¹, ZHANG Zi-de¹, TANG Xia¹

1. College of Food Science and Technology, Agriculture University of Hebei, Baoding 071001, China;
2. College of Traditional Chinese Veterinary Medicine, Agrculture University of Hebei, Dingzhou 073000, China

Received:2006-11-07 Published:2007-04-28

摘要/Abstract

摘要： 以磨盘柿叶片为外植体，通过农杆菌介导法，建立了ACC合成酶基因(ACS)遗传转化体系。研究了预培养时间、农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间和乙酰丁香酮(AS)浓度等因素对基因转化的影响。结果表明：适宜的预培养时间为2 d；用OD₆₀₀值为1.0的菌液侵染15 min、共培养3 d，AS浓度200μmol/L有利于提高转化频率。经PCR分子检测，初步确定ACC合成酶基因已转入磨盘柿组培苗中。

关键词: 磨盘柿, 根癌农杆菌, ACC合成酶基因(ACS), 遗传转化

Abstract: ACC synthase gene was transferred into Mopanshi mediated by Agrobacterium tumefaciens using young leaf of Mopanshi as explant. Effectors that influenced transformation were studied and the optimum genetic transformation system was established. The results showed that 2 d of pre-cultured time, 1.0 OD₆₀₀ of engineering bacterial suspension, 15 min of infection time, 3 d of co-cultured time and 200 μmol/L of AS were optimum for increasing the frequency of transformation. It was proved that the ACS gene had been transferred into Mopanshi by PCR.

Key words: Mopanshi, Agrobacterium tumefaciens, ACC synthase gene(ACS), Genetic transformation

中图分类号:

S665.2

尹虹, 宋春丽, 马俊莲, 张子德, 唐霞. 根癌农杆菌介导的磨盘柿遗传转化体系的优化[J]. 华北农学报, 2007, 22(2): 56-59. doi: 10.3321/j.issn:1000-7091.2007.02.015.

YIN Hong, SONG Chun-li, MA Jun-lian, ZHANG Zi-de, TANG Xia. Optimization of Agrobacterium tumefaciens Mediated Genetic Transformation System of Mopanshi[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2007, 22(2): 56-59. doi: 10.3321/j.issn:1000-7091.2007.02.015.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2007/V22/I2/56

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