不结球白菜SRAP反应体系的建立与优化

doi:10.7668/hbnxb.2010.04.026

华北农学报 ›› 2010, Vol. 25 ›› Issue (4): 119-122. doi: 10.7668/hbnxb.2010.04.026

所属专题： 白菜；

不结球白菜SRAP反应体系的建立与优化

李向, 轩淑欣, 王彦华, 赵建军, 申书兴

河北农业大学园艺学院, 河北保定 071001

收稿日期:2010-06-15 出版日期:2010-08-28
通讯作者: 申书兴(1964- )，男，河北滦南人，教授，博士，主要从事蔬菜遗传育种与生物技术方面的研究。
作者简介:李向(1985- ),女,河北任丘人,硕士,主要从事蔬菜生物技术研究.
基金资助:
国家自然科学基金(30871713);校博士基金

The Optimization of SRAP Amplification Program and System in Non-heading Chinese Cabbage

LI Xiang, XUAN Shu-xin, WANG Yan-hua , ZHAO Jian-jun, SHEN Shu-xing

College of Horticulture, Agricultural University of Hebei, Baoding 071001, China

Received:2010-06-15 Published:2010-08-28

摘要/Abstract

摘要： 以菜薹基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物及模板5种因素个水平对不结球白菜SRAP反应体系进行优化,建立了适合不结球白菜的SRAP-PCR优化反应体系.利用该优化体系,选用30对芸薹属SRAP引物,对5份不结球白菜的基因组进行扩增,筛选出7对具有2条以上特异扩增条带的SRAP引物,验证了该优化体系的稳定性.

关键词: 不结球白菜, SRAP, PCR, 正交试验

Abstract: Using flowering Chinese cabbage (Brassica parachinensis L. H. Bariley) genome DNA as template，the major components of SRAP including concentrations of Mg²⁺，dNTPs，Taq DNA polymerase，primers and template DNA were optimized in this study by orthogonal design with five factors and four levels respectively. The optimum SRAP-PCR reaction system suit for non-heading Chinese cabbage was established. Using this system，five accessions of non-heading Chinese cabbages were used as template DNA to be amplified by 30 SRAP primer pairs designed from Brassica genus. Seven SRAP primer pairs revealed two bands or more in 5 non-heading Chinese cabbage cultivars were selected. The result shows the optimization of SRAP System in non-heading Chinese Cabbage in stable.

Key words: Non-heading Chinese cabbage (Brassica campestris ssp. chinensis Makino), SRAP(Sequence-related amplified polymorphism), PCR, Orthogonal design

中图分类号:

S63.1

李向, 轩淑欣, 王彦华, 赵建军, 申书兴. 不结球白菜SRAP反应体系的建立与优化[J]. 华北农学报, 2010, 25(4): 119-122. doi: 10.7668/hbnxb.2010.04.026.

LI Xiang, XUAN Shu-xin, WANG Yan-hua,ZHAO Jian-jun, SHEN Shu-xing. The Optimization of SRAP Amplification Program and System in Non-heading Chinese Cabbage[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2010, 25(4): 119-122. doi: 10.7668/hbnxb.2010.04.026.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2010/V25/I4/119

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