甜樱桃AFLP反应体系优化及多态性引物的筛选

doi:10.7668/hbnxb.2010.02.024

华北农学报 ›› 2010, Vol. 25 ›› Issue (2): 125-128. doi: 10.7668/hbnxb.2010.02.024

甜樱桃AFLP反应体系优化及多态性引物的筛选

张超杰, 徐维华, 刘万好, 唐美玲

山东省烟台市农业科学研究院果树研究所, 山东烟台 265500

收稿日期:2009-12-11 出版日期:2010-04-28
通讯作者: 唐美玲(1976-),女,山东威海人,在职博士后,主要从事果树分子生物学方面研究。
作者简介:张超杰(1978-),男,山东菏泽人,农艺师,主要从事果树资源和育种研究.
基金资助:
国家自然科学基金资助项目(506090022)

Optimizing of AFLP Analysis System for Sweet Cherry and Screening Polymorphism Primers

ZHANG Chao-jie, XU Wei-hua, LIU Wan-hao, TANG Mei-ling

Fruit Institute of Yantai Agriculture Science Academy, Yantai 265500, China

Received:2009-12-11 Published:2010-04-28

摘要/Abstract

摘要： 以黑珍珠和砂蜜豆为材料,对AFLP分析过程中模板DNA的制备、酶切与连接、酶切连接产物的预扩增与选择性扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳等过程中易出现的问题及其解决方法作了对比研究,建立了一套适合于甜樱桃的AFLP分子标记体系。共筛选了64对引物,其中30对扩增效果理想,能够得到清晰、稳定的条带,平均每对引物扩增条带为60条。该体系的建立为研究甜樱桃遗传多样性和标记农艺性状的技术平台构建奠定了基础。

关键词: 甜樱桃, AFLP

Abstract: The variety Heizhenzhu and Shamidou were used as materials for establishing DNA-AFLP system.Several key factors affecting DNA-AFLP analysis were detected such as DNA extraction,enzymes restriction,adaptor-ligation,pre-amplification and selective amplification.The results indicated that SDS method could be used for extracting ideal DNA from leaf of sweet cherry;500 ng DNA was digested completely by EcoR I and Mse I for 4 h.The reducible results was obtained when the ligation products were diluted to 5 times for pre-amplification template and pre-amplification products were diluted to 20 times for selective amplification.This study established a foundation for studying the cherry genetic diversity and QTL for cherry agricultural character.

Key words: Sweet cherry, AFLP

中图分类号:

S662.5

张超杰, 徐维华, 刘万好, 唐美玲. 甜樱桃AFLP反应体系优化及多态性引物的筛选[J]. 华北农学报, 2010, 25(2): 125-128. doi: 10.7668/hbnxb.2010.02.024.

ZHANG Chao-jie, XU Wei-hua, LIU Wan-hao, TANG Mei-ling. Optimizing of AFLP Analysis System for Sweet Cherry and Screening Polymorphism Primers[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2010, 25(2): 125-128. doi: 10.7668/hbnxb.2010.02.024.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2010/V25/I2/125

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