玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63负调控基因nsdA<sub>mgh</sub>的克隆及序列分析

doi:10.7668/hbnxb.2009.05.017

华北农学报 ›› 2009, Vol. 24 ›› Issue (5): 77-80. doi: 10.7668/hbnxb.2009.05.017

所属专题： 生物技术；

玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63负调控基因nsdA_mgh的克隆及序列分析

沈凤英¹, 刘力强², 吴伟刚³, 李亚宁¹, 刘大群¹

1. 河北农业大学植物保护学院, 河北省植物病虫害生物防治工程技术研究中心, 河北保定 071001;
2. 华北制药集团生物燃料研究所, 河北石家庄 050035;
3. 河北北方学院, 河北张家口 075000

收稿日期:2009-05-13 出版日期:2009-10-28
通讯作者: 刘大群(1958-)，男，河北石家庄人，博士，教授，主要从事植物病害生物防治和分子植物病理学研究。
作者简介:沈凤英(1981-)，女，河北衡水人，在读硕士，主要从事植物病害生物防治研究；李亚宁(1974-)，女，河北石家庄人，博士，副教授，主要从事植物病害生物防治和分子植物病理学研究。
基金资助:
国家自然科学基金项目(30800734);河北省自然科学基金项目(C200900598);国家高技术研究与发展计划“863”项目(2006AA10A211)

Cloning and Sequence Analysis of nsdA_mgh Gene in Streptomyces roseoflavus Men-myco-93-63

SHEN Feng-ying¹, LIU Li-qiang², WU Wei-gang³, LI Ya-ning¹, LIU Da-qun¹

1. College of Plant Protection, Agricultural University of Hebei, Biological Control Center of Plant Diseases and Plant Pests of Hebei Province, Baoding 071001, China;
2. North China Pharmaceutical Corporation, Biofuel Research Institure, Shijiazhuang 050035, China;
3. North University of Hebei, Zhangjiakou 075000, China

Received:2009-05-13 Published:2009-10-28

摘要/Abstract

摘要： nsdA(Negative regulator of Streptomyces differentiation)基因是天蓝色链霉菌中发现的与抗生素合成相关的负调控基因。根据天蓝色链霉菌A3(2)的序列设计引物扩增玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63菌株中的该基因，经测序和序列分析表明，由保守序列引物nsdA-2R和nsdA-2L克隆到的Men-myco-93-63菌株中的该基因800 bp片段与已知nsdA基因核苷酸保守区域序列同源性达到99%，由全长序列扩增引物nsdA WZ-R和nsdA WZ-L克隆到的该基因包含一个完整的开放阅读框，共编码369个氨基酸，与变铅青链霉菌和天蓝色链霉菌A3(2)中的nsdA基因的核苷酸序列同源性达到100%，氨基酸序列同源性达到99%。该全长基因命名为nsdA_mgh，其在玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63中的发现为阻断该负调控基因以期获得抗生素高产工程菌株提供了重要依据。

关键词: 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63, nsdA基因, 克隆, 序列分析

Abstract: nsdA (Negative regulator of Streptomyces differentiation) is globally negative regulator gene first found in Streptomyces coelicolor.In this study,nsdA gene of Streptomyces roseoflavus strains Men-myco-93-63 was amplified using the primer sequences designed from.Streptomyces coelicolor A3(2).After sequencing,Blastn,and Blastx,it showed that the cloned fragment from Streptomyces roseoflavus Men-myco-93-63 with the primer of nsdA-2R and nsdA-2L compairing with reported nsdA conservative nucleotide sequence homology on the region reached 99%.The fulllength gene sequence of Men-myco-93-63 nsdA gene amplification with primers of nsdA WZ-R and nsdA WZ-L had a complete open reading frame encoding 369 amino acids,with the Streptomyces lividans and Streptomyces coelicolor A3(2) nsdA gene at nucleotide sequence 100%,and amino acid sequence homology up to 99%.The fulllength nsdA gene of Streptomyces roseoflavus Men-myco-93-63 was named nsdA_mgh,which will promote the obtaintion of high-yielding antibiotic strains of Streptomyces roseoflavus Men-myco-93-63 through interrupting the negative regulator.

Key words: Streptomyces roseoflavus Men-myco-93-63, nsdA gene, Cloning, Sequence analysis

中图分类号:

Q785

沈凤英, 刘力强, 吴伟刚, 李亚宁, 刘大群. 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63负调控基因nsdA_mgh的克隆及序列分析[J]. 华北农学报, 2009, 24(5): 77-80. doi: 10.7668/hbnxb.2009.05.017.

SHEN Feng-ying, LIU Li-qiang, WU Wei-gang, LI Ya-ning, LIU Da-qun. Cloning and Sequence Analysis of nsdA_mgh Gene in Streptomyces roseoflavus Men-myco-93-63[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2009, 24(5): 77-80. doi: 10.7668/hbnxb.2009.05.017.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2009/V24/I5/77

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