番茄果实果糖激酶基因的克隆及其表达分析

doi:10.7668/hbnxb.2011.03.003

华北农学报 ›› 2011, Vol. 26 ›› Issue (3): 11-15. doi: 10.7668/hbnxb.2011.03.003

所属专题： 番茄；生物技术；

番茄果实果糖激酶基因的克隆及其表达分析

王卫平¹, 崔娜², 于志海¹, 白丽萍¹, 李天来³

1. 沈阳农业大学生物科学技术学院, 辽宁沈阳 110866;
2.沈阳农业大学园艺学院, 设施园艺省部共建教育部重点实验室, 辽宁沈阳 110866

收稿日期:2011-01-29 出版日期:2011-06-28
通讯作者: 崔娜(1968- )，女，辽宁桓仁人，副教授，博士，主要从事设施园艺及发育分子生物学的研究。
作者简介:王卫平(1986- ),女,河北唐山人,硕士,主要从事设施园艺及发育分子生物学的研究.
基金资助:
国家科技支撑项目(2008BADA6B05);辽宁省教育厅科学技术研究项目(2008623);沈阳农业大学博士后基金项目(62658)

Cloning and Expression Analysis of Fructokinase Gene (FRK) from Tomato Fruit

WANG Wei-ping¹, CUI Na², YU Zhi-hai¹, BAI Li-ping¹, LI Tian-lai³

1. Biological Science and Technology College,Shenyang 110866,China;
2. Key Laboratory of Proected Horticulture,Ministry of Education,College of Horticulture, Shenyang Agricultural University,Shenyang 110866,China

Received:2011-01-29 Published:2011-06-28

摘要/Abstract

摘要： 根据GeneBank中已登记的番茄果糖激酶基因的保守序列设计特异引物,以普通栽培型番茄辽园多丽的果实为材料提取总RNA,采用RT-PCR方法,扩增出果糖激酶基因cDNA序列的部分片段并克隆到pBS-T载体中.测序结果表明,LeFRK1-LeFRK3分别与番茄植物中已知该基因的核苷酸序列相似性高达99%以上,构建了一个番茄、马铃薯、烟草及拟南芥植物中FRK基因的系统进化树.采用半定量RT-PCR方法对番茄果实不同发育时期的表达进行检测,FRK1-FRK3在番茄果实发育的过程中均有表达,但在花后2～3 d时表达量较高.

关键词: 番茄, 果糖激酶, RT-PCR, 序列分析, 基因表达

Abstract: PCR primers were designed which based on the consensus domain of some fructokinase genes from tomato registered in GenBank.The cDNA fragments were obtained by reverse transcriptional polymersae chain reaction(RT-PCR)using the whole RNA of tomato,Liaoyuan Duoli(Solanum lycopersicum),as the templates.The fragments were cloned into pBS-T vector and then sequenced.The sequencing results showed highly homology(above 99%) in nucleotide sequence with the published sequences of tomato.A phylogenetic tree of FRK genes from Arabidopsis thaliana,Solanum tuberosum,Nicotiana tabacum and Solanum lycopersicum was constructed.The expression patterns of the cDNAs were examined in tomato fruit during different stages by semi-quantitative RT-PCR.FRK1-FRK3 was expressed in the whole stage of tomato fruit development,and strongly expressed from 25 to 35 days after anthesis.

Key words: Tomato, Fructokinase, RT-PCR, Sequence analysis, Gene expression

中图分类号:

王卫平, 崔娜, 于志海, 白丽萍, 李天来. 番茄果实果糖激酶基因的克隆及其表达分析[J]. 华北农学报, 2011, 26(3): 11-15. doi: 10.7668/hbnxb.2011.03.003.

WANG Wei-ping, CUI Na, YU Zhi-hai, BAI Li-ping, LI Tian-lai. Cloning and Expression Analysis of Fructokinase Gene (FRK) from Tomato Fruit[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2011, 26(3): 11-15. doi: 10.7668/hbnxb.2011.03.003.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2011/V26/I3/11

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