直接利用PCR产物构建RNA干扰表达载体

doi:10.7668/hbnxb.2010.05.011

华北农学报 ›› 2010, Vol. 25 ›› Issue (5): 52-55. doi: 10.7668/hbnxb.2010.05.011

直接利用PCR产物构建RNA干扰表达载体

杨杰¹, 仲维功¹, 王才林¹, 柳青², 王明波², NarayanaM.Upadhyaya²

1. 江苏省农业科学院, 粮食作物研究所, 江苏, 南京, 210014;
2. CSIROPlantIndustry, Canberra, AustralianCapitalTerritories2601, Australia

收稿日期:2010-06-21 出版日期:2010-10-28
作者简介:杨杰(1969-),男,四川南部人,副研究员,博士,主要从事水稻遗传育种研究.
基金资助:
国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08001-005B,019);江苏省自然科学基金项目(BK2009321);国家科技支撑计划重大项目(2006BADO2A03);江苏省农业科技自主创新基金项目(CX[07]603);江苏省政府留学奖学金;江苏省农业科学院基金项目(6110703;6510806)

Using PCR Product to Establish a Binary RNAi Transgenic Construct

YANG JieZHONG¹, WeigongWANG¹, CailinLIU Qing¹, WANG Mingbo², Narayana M. Upadhyaya²

1. Institute of Food Crops, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China;

2. CSIRO Plant Industry, Canberra, Australian Capital Territories 2601, Australia

Received:2010-06-21 Published:2010-10-28

摘要/Abstract

摘要： 利用RNA干扰原理可以对作物进行遗传改良.构建RNA 干扰的发夹结构一般采用在引物两端加酶切位点方法,该方法涉及酶切位点多,步骤繁琐.本试验介绍一种直接利用PCR产物进行RNAi组成型表达载体构建的方法,该载体以潮霉素为筛选标记基因,适合水稻的遗传转化.

关键词: RNA干扰, 双元载体, PCR产物

Abstract: RNAi has been widely used in plant genetic improvement and gene function analysis in recent years. The conventional way to construct the hairpin structure of RNAi binary vector is based on the restriction enzyme digestion and ligation. However,this method is labour intensive and time consumption. In this study,we established a binary transgenic vector with PCR product,which habouring Hpt resistant gene and driving by constitutive promoter,and which would facilitate further rice transformation.

Key words: RNAi, Binary Construct, PCR product

中图分类号:

杨杰, 仲维功, 王才林, 柳青, 王明波, NarayanaM.Upadhyaya. 直接利用PCR产物构建RNA干扰表达载体[J]. 华北农学报, 2010, 25(5): 52-55. doi: 10.7668/hbnxb.2010.05.011.

YANG JieZHONG, WeigongWANG, CailinLIU Qing, WANG Mingbo, Narayana M. Upadhyaya. Using PCR Product to Establish a Binary RNAi Transgenic Construct[J]. ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA, 2010, 25(5): 52-55. doi: 10.7668/hbnxb.2010.05.011.

http://www.hbnxb.net/CN/Y2010/V25/I5/52

参考文献

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