番茄(Solanum lycopersicum)原产于南美洲西部太平洋沿岸安第斯山脉地区[1],具有丰富的营养价值和独特的风味,是人类微量营养元素的重要来源。樱桃番茄具有果形和果色多样化、酸甜可口,是一种经济价值较高的水果型番茄[2]。随着人民生活水平的改善,消费者对番茄风味的追求越来越高。挥发性风味物质是番茄风味的重要组成部分,是评价品质优劣的重要指标。由于挥发性风味物质很难定量,并且易受环境条件的影响[3-6],多年来,育种者对番茄品质的研究主要集中在糖、酸、可溶性固形物等方面,风味品质呈下降趋势[7]。
顶空固相微萃取-气质联用技术的发展为分析挥发性物质提供了便利,该技术能够有效减少分析样品挥发性物质的损失,较为准确地反映样品风味成分及相对含量[8],被成功用于洋葱[9]、梅花[10]、卷柏[11]、松茸[12]、甜瓜[13]、橄榄[14]、普通番茄[15]、百香果[16]挥发性物质分析。番茄风味物质的种类及含量高低与品种基因型、环境胁迫、果实结构部位、栽培因素密切相关[17-21]。嫁接是克服连作障碍提高番茄产量和抗逆性的有效方法,有关嫁接对黄色樱桃番茄品种果实风味物质影响的研究鲜有报道。本研究拟以不同黄色樱桃番茄品种为接穗、以野茄托鲁巴母为砧木材料,探讨嫁接对不同黄色樱桃番茄品种果实挥发性物质含量的影响,以期为黄色樱桃番茄高效生产提供参考。
供试黄色樱桃番茄品种为黄蓉、金露露和黄星,分别由北京博收种子有限公司和北京市农林科学院蔬菜研究中心提供,砧木材料为野茄托鲁巴母。实生苗分别标记为黄蓉S、金露露S和黄星S,嫁接苗分别标记为黄蓉J、金露露J和黄星J。材料于2018年10月底定植于中国热带农业科学院五队试验基地,采取相同的栽培管理措施,每份材料于2019年3月中旬采收成熟度和大小均匀一致的5枚果实进行挥发性物质测定与分析。
1.2.1 仪器设备 HP6890/5975C气相-质谱联用仪购自美国安捷伦公司。手动固相微萃取装置购自美国Supelco公司,萃取纤维头为2 cm-50/30 μm DVB/CAR/PDMS StableFlex。
1.2.2 挥发性风味物质检测 取混匀样品10 g置于10 mL固相微萃取仪采样瓶中,插入装有2 cm-50/30 μm DVB/CAR/PDMS StableFlex纤维头的手动进样器,在60 ℃的平板加热条件下顶空萃取50 min后,移出萃取头并立即插入气相色谱仪进样口(温度250 ℃)中,热解析5 min进样。
色谱柱为FLM FB-5MS (30 m×0.25 mm×0.25 μm)弹性石英毛细管柱,柱温37 ℃保持2 min,以3 ℃/min升温至160 ℃,再以6 ℃/min升温至202 ℃,运行时间为40 min,汽化室温度250 ℃,载气为高纯He(99.999%),柱前压6.89 psi,载气流速为1.0 mL/min,不分流进样;溶剂延迟时间为1 min,离子源为EI源,离子源温度230 ℃;四极杆温度150 ℃,电子能量70 eV,发射电流34.6 μA,倍增器电压1 565 V,接口温度280 ℃,质量范围29~500 amu。
1.2.3 数据处理 总离子流图中的各峰经质谱计算机数据系统检索及核对Nist 14和Wiley 275标准质谱图,确定挥发性化学成分,用峰面积归一化法测定各化学成分的相对质量分数。
由图1、表1可知,黄蓉S和黄蓉J共含有挥发性物质59种,其中醇类14种,酮类3种,酯类3种,醛类18种,烃类11种,其他10种。
2.1.1 黄蓉S挥发性成分分析 黄蓉S含有56种挥发性物质,占色谱流出组分总含量的99.05%。其中醇类14种,相对含量为20.78%,2-甲基-1-丁醇相对含量最高,其次为3-甲基-1-丁醇。酮类3种,相对含量为3.16%,1-戊烯-3-酮相对含量最高。酯类2种,相对含量为3.96%,水杨酸甲酯相对含量最高。醛类17种,相对含量为35.74%,正壬醛相对含量最高,其次为正己醛。烃类10种,相对含量为2.30%,α-蒎烯相对含量最高。其他10种,相对含量为33.12%,2-异丁基噻唑相对含量最高,其次为1-硝基-3-甲基丁烷(表1-2)。
2.1.2 黄蓉J挥发性成分分析 黄蓉J含有56种挥发性物质,占色谱流出组分总含量的98.72%。其中醇类14种,相对含量为24.78%,2-甲基-1-丁醇相对含量最高,其次为3-甲基-1-丁醇。酮类3种,相对含量为1.79%,1-戊烯-3-酮相对含量最高。酯类3种,相对含量为3.28%,水杨酸甲酯相对含量最高。醛类18种,相对含量为32.09%,2-辛烯醛相对含量最高,其次为正己醛。烃类9种,相对含量为3.97%,α-蒎烯相对含量最高。其他9种,相对含量为32.79%,2-异丁基噻唑相对含量最高,其次为1-硝基-3-甲基丁烷(表1-2)。
A.黄蓉S;B.黄蓉J;C.金露露S;D.金露露J;E.黄星S;F.黄星J。
A.Huangrong S; B.Huangrong J; C.Jinlulu S; D.Jinlulu J; E. Huangxing S; F. Huangxing J.
图1 挥发性物质总离子流图
Fig.1 Total ion current chromatograms of volatile compounds
2.1.3 黄蓉S和黄蓉J独特挥发性成分分析 黄蓉S和黄蓉J共鉴定出59种挥发性风味物质,其中包括17种主要风味物质。另外,黄蓉S和黄蓉J挥发性物质种类和含量存在显著性差异。黄蓉S醛类含量最高,其次为其他类、醇类、酯类、酮类和烃类。黄蓉J其他类含量最高,其次为醛类、醇类、烃类、酯类和酮类。黄蓉S含有3种特有挥发性成分,分别为2-噻丁烷、间二甲苯、苯乙烯。黄蓉J含有3种特有挥发性成分,分别为丁醛、乙酸乙酯、正十六烷。
金露露S和金露露J共含有挥发性物质61种,其中醇类14种,酮类3种,酯类4种,醛类20种,烃类10种,其他10种(图1、表1)。
2.2.1 金露露S挥发性成分分析 金露露S含有46种挥发性物质,占色谱流出组分总含量的97.77%。其中醇类10种,相对含量为22.58%,Z-3-已烯醇相对含量最高,其次为1-己醇。酮类2种,相对含量为1.45%,1-戊烯-3-酮相对含量最高。酯类2种,相对含量为0.64%,乙酸乙酯相对含量最高。醛类17种,相对含量为50.75%,正己醛相对含量最高,其次为E-2-己烯醛。烃类8种,相对含量为1.95%,正戊烷相对含量最高。其他7种,相对含量为20.42%,2-异丁基噻唑相对含量最高,其次为1-硝基-3-甲基丁烷(表1-2)。
2.2.2 金露露J挥发性成分分析 金露露J含有57种挥发性物质,占色谱流出组分总含量的97.34%。其中醇类14种,相对含量为26.68%,Z-3-已烯醇相对含量最高,其次为1-己醇。酮类3种,相对含量为2.07%,1-戊烯-3-酮相对含量最高。酯类3种,相对含量为0.90%,水杨酸甲酯相对含量最高。醛类20种,相对含量为52.23%,正己醛相对含量最高,其次为2-辛烯醛。烃类8种,相对含量为0.97%,(+)-2-蒈烯相对含量最高。其他9种,相对含量为14.49%,2-异丁基噻唑相对含量最高,其次为2-戊基呋喃(表1-2)。
2.2.3 金露露S和金露露J独特挥发性成分分析 金露露S和金露露J共鉴定出61种挥发性风味物质,其中包括19种主要风味物质。另外,金露露S和金露露J挥发性物质种类和含量存在显著性差异。金露露S醛类含量最高,其次为醇类、其他类、烃类、酮类和酯类。金露露J醛类含量最高,其次为醇类、其他类、酮类、烃类和酯类。金露露S含有4种特有挥发性成分,分别为己烷、乙酸乙酯、甲苯、1-硝基-3-甲基丁烷。金露露J含有15种特有挥发性成分,分别为正丙醇、2-噻丁烷、1-丁醇、庚醛、己酸甲酯、β-蒎烯、1-庚醇、(+)-2-蒈烯、苯乙腈、E-2-壬烯醛、1-壬醇、水杨酸甲酯、E,Z-2,4-癸二烯醛、1-硝基-2-苯乙烷、β-紫罗兰酮。
表1 嫁接和非嫁接黄色樱桃番茄品种挥发性物质及相对含量
Tab.1 The volatile compounds and relative content in grafted and non-grafted yellow cherry tomato varieties
序号Number类别Categories保留时间/minRetentiontime化合物名称Compound分子式Molecularformula相对含量/% Relative content黄蓉SHuangrong S黄蓉JHuangrong J金露露SJinlulu S金露露JJinlulu J黄星SHuangxing S黄星JHuangxing J醇类11.65乙醇C2H6O1.831.100.870.432.054.7822.03正丙醇C3H8O0.040.02-0.010.040.1132.54异丁醇C4H10O0.210.270.090.070.150.1443.001-丁醇C4H10O0.090.20-0.030.130.0754.273-甲基-1-丁醇C5H12O3.764.170.700.365.383.5564.352-甲基-1-丁醇C5H12O7.906.541.040.626.283.2075.141-戊醇C5H12O1.251.680.961.671.731.2785.25Z-2-戊烯醇C5H10O-----0.2398.13Z-3-已烯醇C6H12O0.822.0113.5510.465.100.86108.701-己醇C6H14O1.322.214.148.591.523.851113.301-庚醇C7H16O0.080.23-0.380.140.211213.361-辛烯-3-醇C8H16O0.360.380.400.630.420.661318.05E-2-辛烯醇C8H16O-----0.161418.131-辛醇C8H18O1.162.060.511.700.851.131520.43苯乙醇C8H10O1.543.490.291.722.240.841622.981-壬醇C9H20O0.410.43-0.040.150.321723.96桃金娘烯醇C10H16O----0.92-酮类183.241-戊烯-3-酮C5H8O2.831.261.211.464.264.78193.413-戊酮C5H10O----1.510.822013.723-辛酮C8H16O0.310.500.240.560.641.112136.53β-紫罗兰酮C13H20O0.020.03-0.050.070.09酯类221.87乙酸甲酯C3H6O2--0.010.02-0.02232.38乙酸乙酯C4H8O2-0.800.63-1.467.30243.70丙酸乙酯C5H10O2----0.040.09253.75乙酸丙酯C5H10O2-----0.05268.85乙酸-2-甲基丁酯C7H14O2-----0.65278.85乙酸异戊酯C7H14O2----0.55-2810.94己酸甲酯C7H14O2---0.04--2923.85水杨酸甲酯C8H8O33.732.35-0.84-1.063027.50水杨酸乙酯C9H10O30.230.13---0.14醛类311.99异丁醛C4H8O0.020.03--0.01-322.21丁醛C4H8O-0.070.020.070.01-332.793-甲基丁醛C5H10O0.891.700.800.231.510.28342.912-甲基丁醛C5H10O0.380.340.210.080.200.08
表1(续)
注:-. 未检测到。
Note:-. The compound is not detected.
序号Number类别Categories保留时间/minRetentiontime化合物名称Compound分子式Molecularformula相对含量/% Relative content黄蓉SHuangrong S黄蓉JHuangrong J金露露SJinlulu S金露露JJinlulu J黄星SHuangxing S黄星JHuangxing J353.41正戊醛C5H10O1.081.110.761.03--364.66E-2-戊烯醛C5H8O0.881.120.550.982.442.02375.88正己醛C6H12O5.715.1226.8517.786.177.46387.84E-2-己烯醛C6H10O0.330.808.733.932.670.18399.82庚醛C7H14O---3.04--4012.30E-2-庚烯醛C7H12O1.992.281.313.702.444.014112.56苯甲醛C7H6O0.743.652.042.681.931.494214.34E,E-2,4-庚二烯醛C7H10O----0.371.214314.49正辛醛C8H16O5.142.421.441.690.881.774416.68苯乙醛C8H8O0.901.850.610.430.84-4517.212-辛烯醛C8H14O5.705.663.249.635.7913.044619.46正壬醛C9H18O8.992.812.201.351.922.904722.29E-2-壬烯醛C9H16O---0.06-0.134823.76Z-4-癸烯醛C10H18O0.891.870.772.140.540.594924.33癸醛C10H20O0.950.520.610.270.580.465024.91β-环柠檬醛C10H16O0.040.050.080.040.080.065128.50E,Z-2,4-癸二烯醛C10H16O1.110.69-2.981.793.715228.91E,E-2,4-癸二烯醛C10H16O--0.520.100.120.31烃类531.74正戊烷C5H120.330.240.480.220.280.17542.23己烷C6H140.220.110.07-0.060.03554.95甲苯C7H80.240.230.29-0.110.10568.42间二甲苯C8H100.23-----579.38苯乙烯C8H80.15-0.140.150.130.12589.68壬烷C9H200.220.200.140.020.110.175911.05α-蒎烯C10H160.612.300.320.110.110.096013.02β-蒎烯C10H160.210.64-0.08--6114.27(+)-2-蒈烯C10H16---0.26--6215.64β-水芹烯C10H16--0.440.100.030.036315.65柠檬烯C10H160.040.05----6428.321-壬烯-3-炔C9H14-----1.046532.95正十四烷C14H300.050.130.070.030.100.066641.02正十六烷C16H34-0.06----其他671.58甲硫醇CH4S0.090.100.200.080.110.06681.832-硫代丙烷C2H6S0.400.320.250.070.130.05692.282-甲基呋喃C5H6O0.040.020.020.020.030.04702.382-噻丁烷C3H8S0.32--0.53--713.482-乙基呋喃C6H8O0.110.110.390.130.410.25729.861-硝基-3-甲基丁烷C5H11NO212.3810.012.58-5.912.667313.932-戊基呋喃C9H14O1.812.421.554.112.203.347415.922-异丁基噻唑C7H11NS17.0818.5115.439.1422.8410.957519.17愈创木酚C7H8O20.090.39---0.617621.55苯乙腈C8H7N---0.310.08-7728.981-硝基-2-苯乙烷C8H9NO20.810.90-0.110.72-
黄星S和黄星J共含有挥发性物质68种,其中醇类17种,酮类4种,酯类8种,醛类20种,烃类9种,其他10种(图1、表1)。
2.3.1 黄星S挥发性成分分析 黄星S含有58种挥发性物质,占色谱流出组分总含量的99.27%。其中醇类15种,相对含量为27.11%,2-甲基-1-丁醇相对含量最高,其次为3-甲基-1-丁醇。酮类4种,相对含量为6.48%,1-戊烯-3-酮相对含量最高,其次为3-戊酮。酯类3种,相对含量为2.05%,乙酸乙酯相对含量最高。醛类19种,相对含量为30.28%,正己醛相对含量最高,其次为2-辛烯醛。烃类8种,相对含量为0.93%,正戊烷相对含量最高。其他9种,相对含量为32.44%,2-异丁基噻唑相对含量最高,其次为1-硝基-3-甲基丁烷。
2.3.2 黄星J挥发性成分分析 黄星J含有61种挥发性物质,占色谱流出组分总含量的96.96%。其中醇类16种,相对含量为21.39%,乙醇相对含量最高,其次为1-己醇。酮类4种,相对含量为6.80%,1-戊烯-3-酮相对含量最高,其次为3-辛酮。酯类7种,相对含量为9.30%,乙酸乙酯相对含量最高。醛类17种,相对含量为39.70%,2-辛烯醛相对含量最高,其次为正己醛。烃类9种,相对含量为1.82%,1-壬烯-3-炔相对含量最高。其他8种,相对含量为17.96%,2-异丁基噻唑相对含量最高,其次为2-戊基呋喃。
2.3.3 黄星S和黄星J独特挥发性成分分析 黄星S和黄星J共鉴定出68种挥发性风味物质,其中包括20种主要风味物质。另外,黄星S和黄星J挥发性物质种类和含量存在显著性差异。黄星S其他类含量最高,其次为醛类、醇类、酮类、酯类和烃类。黄星J醛类含量最高,其次为醇类、其他类、酯类、酮类和烃类。黄星S含有7种特有挥发性成分,分别为异丁醛、丁醛、乙酸异戊酯、苯乙醛、苯乙腈、桃金娘烯醇、1-硝基-2-苯乙烷。黄星J含有10种特有挥发性成分,分别为乙酸甲酯、乙酸丙酯、Z-2-戊烯醇、乙酸-2-甲基丁酯、E-2-辛烯醇、愈创木酚、E-2-壬烯醛、水杨酸甲酯、水杨酸乙酯、1-壬烯-3-炔。
表2 嫁接和非嫁接黄色樱桃番茄品种挥发性物质类别及相对含量
Tab.2 The volatile categories and relative content in grafted and non-grafted yellow cherry tomato varieties %
类别Categories相对含量 Relative content 黄蓉SHuangrong S黄蓉JHuangrong J金露露SJinlulu S金露露JJinlulu J黄星SHuangxing S黄星JHuangxing J醇类 Alcohol20.78 24.78 22.58 26.68 27.11 21.39 酮类 Ketone3.16 1.79 1.45 2.076.48 6.80 酯类 Ester3.96 3.28 0.64 0.90 2.05 9.30 醛类 Aldehyde35.74 32.09 50.75 52.23 30.28 39.70 烃类 Alkane2.30 3.97 1.95 0.97 0.93 1.82 其他 Others33.12 32.79 20.42 14.49 32.44 17.96
Tieman等[7]研究表明,番茄含有36种主要风味物质,分别为醇类、醛类、酮类、烃类、酯类以及含硫化合物等。本研究分析了3个黄色樱桃番茄品种实生苗和对应嫁接苗果实挥发性风味物质的差异。黄蓉S和黄蓉J共鉴定出59种挥发性风味物质,其中包括17种主要风味物质。黄蓉S含有3种特有挥发性物质,黄蓉J含有3种特有挥发性物质。金露露S和金露露J共鉴定出61种挥发性风味物质,其中包括19种主要风味物质。金露露S含有4种特有挥发性物质,其中1-硝基-3-甲基丁烷为主要风味物质。金露露J含有15种特有挥发性物质,其中庚醛、苯乙腈、1-硝基-2-苯乙烷、β-紫罗兰酮为主要风味物质。黄星S和黄星J共鉴定出68种挥发性风味物质,其中包括20种主要风味物质。黄星S含有7种特有挥发性物质,其中苯乙醛、苯乙腈和1-硝基-2-苯乙烷为主要风味物质。黄星J含有10种特有挥发性物质,其中愈创木酚为主要风味物质。
综合比较黄蓉S和黄蓉J、金露露S和金露露J、黄星S和黄星J 3组挥发性物质发现,实生苗和嫁接苗之间各类挥发性风味物质的相对含量存在显著不同。嫁接苗挥发性风味物质的种类多高于实生苗,本研究表明嫁接对黄色樱桃番茄品种的风味物质代谢具有显著影响。
2-甲基-1-丁醇、β-紫罗兰酮、E-2-庚烯醛和Z-4-癸烯醛为番茄的主要风味物质。2-甲基-1-丁醇通过氨基酸代谢途径形成,赋予番茄果实焦糖香味[22],在黄蓉S和黄蓉J、金露露S和金露露J、黄星S和黄星J中的相对含量分别为7.90%和6.54%,1.04%和0.62%,6.28%和3.20%。β-紫罗兰酮通过类胡萝卜素代谢途径形成,具有果香味[23],在黄蓉S和黄蓉J、金露露S和金露露J、黄星S和黄星J中的相对含量分别为0.02%和0.03%,0和0.05%,0.07%和0.09%。E-2-庚烯醛在黄蓉S和黄蓉J、金露露S和金露露J、黄星S和黄星J中的相对含量分别为1.99%和2.28%,1.31%和3.70%,2.44%和4.01%。Z-4-癸烯醛在黄蓉S和黄蓉J、金露露S和金露露J、黄星S和黄星J中的相对含量分别为0.89%和1.87%,0.77%和2.14%,0.54%和0.59%。在所分析的黄色樱桃番茄品种中,与实生苗相比,对应嫁接苗果实中2-甲基-1-丁醇的相对含量呈下降趋势,β-紫罗兰酮、E-2-庚烯醛和Z-4-癸烯醛呈增加趋势。嫁接如何调节番茄果实风味物质代谢,如何影响番茄风味品质将是下一步的研究计划。
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